[发明专利]降低细胞内蛋白质水平的方法

权利要求书

1.一种降低细胞内至少一种靶蛋白水平的方法，所述方法包括使第一试剂和第二试剂与所述细胞接触的步骤，其中所述第一试剂减少所述靶蛋白的合成，所述第二试剂增加所述靶蛋白的降解，并且其中所述第一试剂在所述第二试剂之前、之后或同时与所述细胞接触。

2.如权利要求1所述的方法，其中所述第一试剂降低所述靶蛋白mRNA的水平或减少所述靶蛋白mRNA的翻译。

3.如权利要求1所述的方法，其中所述第一试剂是RNAi分子。

4.如权利要求3所述的方法，其中所述RNAi分子是小干扰RNA（siRNA）。

5.如权利要求3所述的方法，其中所述RNAi分子是小发夹RNA（shRNA）。

6.如权利要求3所述的方法，其中所述RNAi分子是小分子核糖核酸（miRNA）。

7.如权利要求1所述的方法，其中所述第一试剂是双链RNA（dsRNA）。

8.如权利要求1所述的方法，其中所述第一试剂是反义寡核苷酸。

9.如权利要求1所述的方法，其中所述第一试剂是核酶。

10.如权利要求1所述的方法，其中所述第二试剂是嵌合多肽，所述嵌合多肽包含泛素连接酶多肽和靶蛋白相互作用结构域。

11.如权利要求10所述的方法，其中所述泛素连接酶多肽是E3泛素连接酶多肽。

12.如权利要求11所述的方法，其中所述E3泛素连接酶多肽选自SCF多肽、HECT多肽和UBR1多肽。

13.如权利要求12所述的方法，其中所述SCF多肽是F-box多肽。

14.如权利要求13所述的方法，其中所述F-box多肽选自Cdc4/FBW 7、HOS、βTrCP、FWD1、Poplp、Pop2p、Grrlp和Met30p。

15.如权利要求12所述的方法，其中所述HECT多肽选自E6AP、Nedd4、RSP5、Smurf1、TOM1和EDD。

16.如权利要求10所述的方法，其中所述靶蛋白相互作用结构域选自乳头瘤病毒E7多肽和SV-40LTP多肽。

17.如权利要求1所述的方法，其中所述靶蛋白选自Rb、p107、IκB、Sic1p、Cln2p、E2、c-myc和β-连环蛋白（β-catenin）。

18.如权利要求1所述的方法，其中所述靶蛋白是细胞质蛋白、核内蛋白或者膜蛋白。

19.如权利要求1所述的方法，其中所述第一试剂和所述第二试剂在分开的递送载体中。

20.如权利要求1所述的方法，其中所述第一试剂和所述第二试剂在同一递送载体中。

21.如权利要求1所述的方法，其中所述细胞是哺乳动物细胞。

22.如权利要求21所述的方法，其中所述哺乳动物细胞是人类细胞或者小鼠细胞。

23.如权利要求1所述的方法，其中所述方法用于在对象中治疗或预防疾病或状况。

24.如权利要求23所述的方法，其中所述方法用于治疗或预防癌症。

25.如权利要求23所述的方法，其中所述方法用于治疗或预防心血管疾病。

26.如权利要求1所述的方法，其中所述方法用于在对象中诊断疾病或状况。

27.一种表达载体，所述表达载体包含编码第一试剂的第一核酸序列和编码第二试剂的第二核酸序列，其中所述第一试剂减少靶蛋白的合成，所述第二试剂增加所述靶蛋白的降解。

28.如权利要求27所述的表达载体，其中所述第一试剂降低所述靶蛋白mRNA的水平或者减少所述靶蛋白mRNA的翻译。

29.如权利要求27所述的表达载体，其中所述第一试剂是RNAi分子。

30.如权利要求29所述的表达载体，其中所述RNAi分子是小发夹RNA（shRNA）。