[发明专利]用于检测人乳头瘤病毒(HPV)的密切相关的血清型的测定法

权利要求书

1.一种用于检测生物体的多个血清型在生物学样品中的存在或不存在的多重测定法，其中所述测定法检测比用于检测的通道更多的血清型，包括:

提供生物学样品；

在使得探针和引物与靶序列退火的条件下，将所述生物学样品与至少3个寡核苷酸引物/探针组接触，每一个寡核苷酸引物/探针组包含至少一种被可检测地标记并且具有约10至约50的核苷酸序列长度的寡核苷酸探针和至少两种寡核苷酸引物，每一种寡核苷酸引物具有约10至约150的核苷酸序列长度，并且其中每一个引物/探针组至少对于生物体的特定血清型是偏向性的，其中第一和第二引物/探针组彼此是简并的，并且其中所述简并探针各自具有发射可在相同通道上被检测的信号的信号部分，并且其中第三引物/探针组相对于另外两个引物/探针组不是简并的，并且辨别第三血清型，所述第三血清型不是所述简并引物/探针组偏向于与其退火的血清型，并且其中所述第三引物/探针组具有以这样的波长发射信号的信号部分，所述波长与由所述简并探针的信号部分发射的波长相同或不同；

如果存在的话，扩增靶序列；和

监测标记的检测，作为所述探针组对所述靶序列的杂交的指示，从而指示HPV的至少一种血清型的存在或不存在。

2.权利要求1的测定法，其中所述生物体为人乳头瘤病毒(HPV)。

3.权利要求2的测定法，其中所述简并引物/探针组的靶选自SEQID NO.36-38。

4.权利要求2的测定法，其中所述简并引物/探针组的靶为SEQ IDNO.36，并且其中所述第三引物/探针组经构造用于辨别HPV血清型51并且相对于所述第一或第二引物/探针组不是简并的，其中所述第三引物/探针组选自下列中的至少一个：选自SEQ ID NO.24-29的序列以及与SEQ ID NO.24-29具有至少70%同源性的序列;所述第一引物/探针组选择HPV血清型39并且不区分HPV血清型39与HPV血清型68，其中所述第一引物/探针组选自下列中的至少一个：选自SEQ ID NO.1、3和5的序列以及与SEQ ID NO.1、3和5具有至少70%的同源性的序列;并且所述第二引物/探针组选择HPV血清型68并且不区分HPV 68血清型与HPV血清型39，其中所述第二引物/探针组选自下列中的至少一个：选自SEQ IDNO.2、4和6的序列以及与SEQ ID NO.2、4和6具有至少70%同源性的序列。

5.权利要求2的测定法，其中所述简并引物/探针组的靶为SEQ IDNO.37，并且其中所述第三引物/探针组经构造用于辨别HPV血清型59并且相对于所述第一或第二引物/探针组不是简并的，其中所述第三引物/探针组选自下列中的至少一个：选自SEQ IDNO.30-35的序列和与SEQ ID NO.30-35具有至少70%的同源性的序列;所述第一引物/探针组选择HPV血清型33并且不区分HPV血清型33与HPV血清型58，其中所述第一引物/探针组选自下列中的至少一个：选自SEQ ID NO.7、9、11、13和15的序列以及与SEQ ID NO.7、9、11、13和15具有至少70%同源性的序列;并且所述第二引物/探针组选择HPV血清型58并且不区分HPV 58血清型与HPV血清型33，其中所述第二引物/探针组选自下列中的至少一个：选自SEQ ID NO.8、10、12、14和16的序列以及与SEQ ID NO.8、10、12、14和16具有至少70%同源性的序列。

6.权利要求2的测定法，其中所述简并引物/探针组的靶为SEQ IDNO.38，并且其中所述第三引物/探针组经构造用于辨别HPV血清型59并且相对于所述第一或第二引物/探针组不是简并的，其中所述第三引物/探针组选自下列中的至少一个：选自SEQ ID NO.30-35的序列和与SEQ ID NO.30-35具有至少70%同源性的序列;所述第一引物/探针组选择HPV血清型56并且不区分HPV 66血清型与HPV血清型56，其中所述第一引物/探针组选自下列中的至少一个：选自SEQ ID NO.17、19和21的序列以及与SEQ ID NO.17、19和21具有至少70%同源性的序列;以及所述第二引物/探针组选择HPV血清型66并且不区分HPV 66血清型与HPV血清型56，其中所述第二引物/探针组选自下列中的至少一个：选自SEQ ID NO.18、20、22和23的序列以及与SEQ ID NO.18、20、22和23具有至少70%同源性的序列。