[发明专利]展示抗体的方法无效
申请号: | 201180018943.1 | 申请日: | 2011-04-12 |
公开(公告)号: | CN103476941A | 公开(公告)日: | 2013-12-25 |
发明(设计)人: | 亨利·吉;周和悦;张彦良;查尔斯·罗迪 | 申请(专利权)人: | 索伦托治疗有限公司 |
主分类号: | C12P21/00 | 分类号: | C12P21/00 |
代理公司: | 广州华进联合专利商标代理有限公司 44224 | 代理人: | 黎艳;万志香 |
地址: | 美国加*** | 国省代码: | 美国;US |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 展示 抗体 方法 | ||
1.一种分离特异性结合至抗原的免疫球蛋白功能部分的方法,包括:
(a)用编码免疫球蛋白功能部分的核酸序列转化细胞;
(b)分离用编码免疫球蛋白功能部分的核酸序列转化的细胞,从而生成寄主细胞群;
(c)用抗原接触寄主细胞;
(d)选择特异性结合抗原的寄主细胞;并且
(e)分离编码免疫球蛋白功能部分的核酸序列。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述免疫球蛋白功能部分为免疫球蛋白的轻链,免疫球蛋白的重链,Fab区域,Fv区域或它们的组合。
3.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述免疫球蛋白功能部分为免疫球蛋白轻链的可变部分,免疫球蛋白轻链的恒定部分,免疫球蛋白重链的可变部分,免疫球蛋白重链的恒定部分或它们的组合。
4.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述编码免疫球蛋白功能部分的核酸序列进一步包括跨膜区域序列。
5.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述编码免疫球蛋白功能部分的核酸序列包含在质粒内。
6.根据权利要求5所述的方法,其特征在于,所述质粒进一步包括哺乳动物附加型复制起点,启动子,耐抗生素基因,或它们的组合。
7.根据权利要求5所述的方法,其特征在于,所述寄主细胞为细菌细胞,酵母细胞或哺乳动物细胞。
8.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述抗原用荧光分子,接头分子或磁颗粒标记。
9.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,通过磁分离或流式细胞分选选择与抗原相互作用的寄主细胞。
10.一种分离特异性结合至抗原的免疫球蛋白的方法,包括:
(a)用选自以下的核酸序列转化多个细胞:
i. 编码免疫球蛋白重链的核酸序列;
ii.编码免疫球蛋白轻链的核酸序列;或
iii.编码免疫球蛋白重链的核酸序列和编码免疫球蛋白轻链的核酸序列;
(b)分离用核酸序列转化的细胞,从而生成寄主细胞群;
(c)用抗原接触寄主细胞群;
(d)选择特异性结合抗原的寄主细胞;并且
(e)分离核酸序列。
11.根据权利要求10所述的方法,其特征在于,所述免疫球蛋白为功能性抗体。
12.根据权利要求10所述的方法,其特征在于,所述免疫球蛋白为单链抗体(SCA)。
13.根据权利要求10所述的方法,其特征在于,所述免疫球蛋白为scFv。
14.根据权利要求10所述的方法,其特征在于,所述编码重链,轻链或两者的核酸序列进一步包括跨膜区域序列。
15.根据权利要求10所述的方法,其特征在于,所述编码重链的核酸序列和编码轻链的核酸序列包含在质粒内。
16.根据权利要求10所述的方法,其特征在于,所述编码重链的核酸序列包含在第一个质粒内,而所述编码轻链的核酸序列包含在第二个质粒内。
17.根据权利要求12所述的方法,其特征在于,所述质粒进一步包括哺乳动物附加型复制起点、启动子、耐抗生素基因、或它们的组合。
18.根据权利要求10所述的方法,其特征在于,所述寄主细胞为细菌细胞、酵母细胞或哺乳动物细胞。
19.根据权利要求10所述的方法,其特征在于,所述抗原用荧光分子、接头分子或磁颗粒标记。
20.根据权利要求10所述的方法,其特征在于,通过磁分离或流式细胞分选选择与抗原相互作用的寄主细胞。
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