[发明专利]寡聚体特异性淀粉样蛋白β表位和抗体

说明书

相关申请的交叉引用

本申请要求2010年3月3日提交的美国临时专利申请第61/310,167号的优先权，其整体援引加入本文。

发明领域

本发明涉及Aβ寡聚体中的新构象表位、相关抗体组合物和使用方法。

发明背景

阿尔茨海默病(AD)是常见的痴呆(紊乱的记忆和认知)神经变性疾病，其与主要由Aβ(1-40)、Aβ(1-42)和Aβ(1-43)肽(也称为淀粉样蛋白β或Aβ)组成的胞外斑块的脑积累相关，Aβ(1-40)、Aβ(1-42)和Aβ(1-43)肽均为淀粉样蛋白前体蛋白(APP)的蛋白水解产物。此外，主要由异常磷酸化的tau蛋白(神经元微管相关蛋白)组成的神经原纤维缠结在濒死神经元中细胞内积累。Aβ(1-42)是AD患者的淀粉样蛋白斑块中的优势种类。

家族形式的AD可以由APP基因或者早老蛋白1或2基因中的突变引起，早老蛋白1或2的蛋白产物与APP加工成Aβ有关。载脂蛋白E等位变体也影响散发性和家族形式的AD的发病年龄。最近，据发现其中的肽寡聚化的Aβ的特定分子种类介导AD和该疾病的小鼠模型中观察到的神经毒性的主要组分(Walsh et al.2002)。Aβ寡聚体毒性可以通过神经元胰岛素受体的功能异常(Zhao et al.2008)，以及通过干扰正常突触功能，特别是在海马中，通过谷氨酸能受体的异位激活(De Felice et al.2007;Nimmrich et al.2008)来显示。已报道Aβ寡聚体与朊病毒蛋白PrPC的正常细胞同种型之间的纳摩尔亲和力结合相互作用(Lauren et al.2009)。而且，PrPC与包括谷氨酸受体亚基(Khosravani et al.2008)在内的各种毒性信号传导途径(Solforosi et al.2004;Lefebvre-Roque et al.2007)之间的相互作用可以导致Aβ寡聚体毒性的统一机制。

清楚认识到Aβ的免疫识别可以导致表达人突变淀粉样蛋白前体蛋白的转基因小鼠的病理学和行为改善。然而，用“非选择性”Aβ免疫疗法治疗人类有固有的危险。例如，自身免疫脑膜脑炎发生在约10%的接受包含非选择性Aβ免疫原的阿尔茨海默病疫苗的患者中(Gelinas et al.2004;Robinson et al.2004;Broytman and Malter 2004;Mathews and Nixon2003)。虽然所致的脑膜脑炎可能是由于对Aβ的细胞免疫激活导致的，但是还证实与细胞免疫应答脱离的被动注入的Aβ单克隆抗体(mAb)与脑微出血有关(Goni and Sigurdsson 2005)。用Aβ非选择性免疫的另一风险是暴露在脑神经元和循环单核细胞表面的亲本蛋白APP的免疫识别(Jung et al.1996;Jung et al.1990)。这样的细胞表面膜分子的识别可以引发裂解或干扰APP蛋白的胞外结构域的功能，这可以包括营养活性(Morimoto et al.1998;Mileusnic et al.2005;Mileusnic et al.2000)。

Aβ肽的“非特异性”识别的另一问题是，Aβ肽仅是毒性Aβ分子种类Aβ寡聚体的前体。据证实Aβ寡聚体杀死培养的细胞系和神经元(Lambert et al.2007;Lacor et al.2007;Ronicke et al.2008)，并且在切片培养和活动物中阻断称为长时程增强(LTP)的促进记忆的关键突触活性(Balducci et al.2010;Shankar et al.2008;Selkoe 2008;Klyubin et al.2005;Walsh et al.2002;Wang et al.2002)。已鉴定特异性Aβ寡聚体，其与小鼠中的记忆缺陷的发病有关，并且在纯化并注入正常年轻大鼠时其再现小鼠中发现的消极行为缺陷(Lesne et al.2006)。相似的研究已证实，PrPC可以用作Aβ寡聚体的受体，并且可以将在突触LTP中断转导其毒性作用(Lauren et al.2009)。