[发明专利]稳定的功能嵌合纤维二糖水解酶I类酶

权利要求书

1.一种基本上纯化的嵌合多肽，包含来自至少两个不同的亲本纤维二糖水解酶I(CBH I)多肽的至少两个结构域，其中所述结构域从N端到C端包含：(区段1)-(区段2)-(区段3)-(区段4)-(区段5)-(区段6)-(区段7)-(区段8)；

其中：区段1包含与SEQ ID NO：2(“1”)、SEQ ID NO：4(“2”)、SEQ IDNO：6(“3”)、SEQ ID NO：8(“4”)或SEQ ID NO：10(“5”)的氨基酸残基从大约1或从大约18或19到大约x₁至少50-100％相同的序列；区段2包含与SEQID NO：2(“1”)、SEQ ID NO：4(“2”)、SEQ ID NO：6(“3”)、SEQ ID NO：8(“4”)或SEQ ID NO：10(“5”)的氨基酸残基x₁到大约x₂至少50-100％相同的序列；区段3包含与SEQ ID NO：2(“1”)、SEQ ID NO：4(“2”)、SEQ ID NO：6(“3”)、SEQ ID NO：8(“4”)或SEQ ID NO：10(“5”)的氨基酸残基x₂到大约x₃至少50-100％相同的序列；区段4包含与SEQ ID NO：2(“1”)、SEQ ID NO：4(“2”)、SEQ ID NO：6(“3”)、SEQ ID NO：8(“4”)或SEQ ID NO：10(“5”)的氨基酸残基x₃到大约x₄至少50-100％相同的序列；区段5包含与SEQ ID NO：2(“1”)、SEQ ID NO：4(“2”)、SEQ ID NO：6(“3”)、SEQ ID NO：8(“4”)或SEQ IDNO：10(“5”)的氨基酸残基x₄到大约x₅至少50-100％相同的序列；区段6包含与SEQ ID NO：2(“1”)、SEQ ID NO：4(“2”)、SEQ ID NO：6(“3”)、SEQID NO：8(“4”)或SEQ ID NO：10(“5”)的氨基酸残基x₅到大约x₆至少50-100％相同的序列；区段7包含与SEQ ID NO：2(“1”)、SEQ ID NO：4(“2”)、SEQ ID NO：6(“3”)、SEQ ID NO：8(“4”)或SEQ ID NO：10(“5”)的氨基酸残基x₆到大约x₇至少50-100％相同的序列；及区段8包含与SEQ ID NO：2(“1”)、SEQ ID NO：4(“2”)、SEQ ID NO：6(“3”)、SEQ ID NO：8(“4”)或SEQID NO：10(“5”)的氨基酸残基x₇到大约x₈至少50-100％相同的序列；

其中x₁是SEQ ID NO：2、4、6或8的残基47、48、49、50、51或52，或是SEQ ID NO：10的残基48、49、50、51、52或53；x₂是SEQ ID NO：2或10的残基92、93、94、95、96或97，或是SEQ ID NO：4、6或8的残基91、92、93、94、95或96；x₃是SEQ ID NO：2的残基127、128、129、130、131或132，或是SEQ ID NO：4或6的残基125、126、127、128、129或130，或是SEQ ID NO：8的残基126、127、128、129、130或131，或是SEQ ID NO：10的残基123、124、125、126、127或128；x₄是SEQ ID NO：2的残基175、176、177、178、180或181，或是SEQ ID NO：4或SEQ ID NO：6的残基173、174、175、176、177或178，或是SEQ ID NO：8的残基174、175、176、177、178或179，或是SEQ ID NO：10的残基171、172、173、174、175或176；x₅是SEQ ID NO：2的残基221、222、223、224、225或226，或是SEQ ID NO：4或SEQ ID NO：6的残基219、220、221、222、223或224，或是SEQ ID NO：8的残基220、221、222、223、224或225，或是SEQ ID NO：10的残基217、218、219、220、221或222；x₆是SEQ ID NO：2的残基268、269、270、271、272或273，或是SEQ ID NO：4或SEQ ID NO：6的残基266、267、268、269、270或271，或是SEQ ID NO：8的残基267、268、269、270、271或272，或是SEQ ID NO：10的残基264、265、266、267、268或269；x₇是SEQ ID NO：2的残基384、385、386、387、388或389，或是SEQ ID NO：4的残基385、386、387、388、389或390，或是SEQ ID NO：6的残基378、379、380、381、382或383，或是SEQ ID NO：8或10的残基383、384、385、386、387或388；并且x₈是对应于SEQ ID NO：2的残基454、SEQ ID NO：4的残基457、SEQ ID NO：6的残基458、SEQ IDNO：8的残基453、SEQ ID NO：10的残基455、或者具有序列SEQ ID NO：2、SEQ ID NO：4、SEQ ID NO：6、SEQ ID NO：8或SEQ ID NO：10的多肽的C端的氨基酸残基，

其中所述嵌合多肽具有纤维二糖水解酶活性和与包含SEQ ID NO：2、4、6、8或10的CBH I多肽相比改善的热稳定性、pH稳定性和/或表达。