[发明专利]维生素D化合物的释放制剂

权利要求书

1.用于从维生素D-结合蛋白释放维生素D化合物的体外方法，包括以下步骤：

a)提供待研究的样品以及

b)使步骤(a)的样品与以下物质混合：

i)含有浓度为0.1M至2.0M的碳酸氢盐或者能够在水解后释放碳酸氢根离子(HCO₃^-)的物质的试剂，

ii)还原剂，和

iii)碱化剂，

由此从维生素D-结合蛋白释放所述维生素D化合物。

2.权利要求1的方法，其中所述步骤(i)的试剂在用于从维生素D-结合蛋白释放维生素D化合物的适当条件下在水溶液中为可溶的。

3.权利要求1至2中任一项的方法，其中所述步骤(i)的试剂含有浓度为0.1M至2.0M的碳酸氢盐。

4.权利要求1至2中任一项的方法，其中所述步骤(i)的试剂含有浓度为0.1M至2.0M的能够在水解后释放碳酸氢根离子(HCO₃^-)的物质。

5.权利要求1、2和4中任一项的方法，其中能够在水解后释放碳酸氢根离子(HCO₃^-)的所述物质为环状或者非环状的碳酸酯或者其各自的羟基化或者卤化衍生物。

6.权利要求1至5中任一项的方法，其中所述样品为液体样品。

7.权利要求1至5中任一项的方法，其中所述样品为血液、血清或者血浆。

8.用于测量维生素D化合物的体外方法，包括以下步骤：

a)根据权利要求1至7中任一项的方法从维生素D-结合蛋白释放维生素D化合物，以及

b)测量步骤(a)中释放的维生素D化合物。

9.权利要求8的方法，其中所述维生素D化合物选自25-羟基维生素D₂、25-羟基维生素D₃、24,25-二羟基维生素D₂、24,25-二羟基维生素D₃和C3-表-25-羟基维生素D。

10.权利要求9的方法，其中确定了所述维生素D化合物为25-羟基维生素D₂和/或者25-羟基维生素D₃。

11.用于从维生素D-结合蛋白释放维生素D化合物的试剂组合物，包含选自以下的物质：浓度为0.1M至2.0M的碳酸氢盐或者能够在水解后释放碳酸氢根离子(HCO₃^-)的物质，以及还原剂。

12.权利要求11的试剂组合物，其特征在于所述还原剂选自2-巯基乙醇、2-巯基乙胺-HCl、TCEP、半胱氨酸-HCl、二硫苏糖醇(DTT)、N-甲基马来酰亚胺、Ellman试剂和1,2-二硫杂环戊烷-3-羧酸。

13.权利要求11的试剂组合物，其特征在于所述还原剂选自2-巯基乙醇、2-巯基乙胺-HCl、TCEP、半胱氨酸-HCl和二硫苏糖醇(DTT)。

14.权利要求11至13中任一项的试剂组合物，其特征在于所述还原剂具有2mM至30mM的浓度。

15.试剂混合物，包含待研究的样品、权利要求11至14中任一项的试剂组合物以及碱化剂。

16.权利要求15的试剂混合物，其特征在于所述碱化剂选自NaOH、KOH、Ca(OH)₂和LiOH。

17.权利要求11至14中任一项的试剂组合物以及碱化剂在将维生素D化合物从维生素D-结合蛋白释放中的用途。

18.用于从维生素D-结合蛋白释放维生素D化合物的试剂盒，其含有权利要求11至14中任一项的试剂组合物。

19.用于检测从维生素D-结合蛋白释放的维生素D化合物的试剂盒，其含有权利要求11至14中任一项的试剂组合物以及碱化剂。