[发明专利]由甘油高产率制备3-羟基丙酸的方法有效
申请号: | 201180025904.4 | 申请日: | 2011-05-24 |
公开(公告)号: | CN103038335A | 公开(公告)日: | 2013-04-10 |
发明(设计)人: | 金哲镐;徐正又;罗莲花 | 申请(专利权)人: | 韩国生命工学研究院 |
主分类号: | C12N1/21 | 分类号: | C12N1/21;C12N15/53;C12P7/40 |
代理公司: | 隆天国际知识产权代理有限公司 72003 | 代理人: | 崔香丹;洪燕 |
地址: | 韩国大*** | 国省代码: | 韩国;KR |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 甘油 高产 制备 羟基 丙酸 方法 | ||
1.一种突变微生物,其是在具有产生辅酶B12能力且具有能够以甘油作为碳源而产生3-羟基丙酸的能力的微生物中,插入或扩增丙二醇利用蛋白编码基因而获得的突变微生物。
2.根据权利要求1所述的突变微生物,其中,所述丙二醇利用蛋白编码基因是罗伊乳杆菌(Lactobacillus reuteri)的丙二醇利用蛋白编码基因(PduP)。
3.根据权利要求1所述的突变微生物,其中,所述具有产生辅酶B12能力且具有能够以甘油作为碳源而产生3-羟基丙酸的能力的微生物是肺炎克雷伯菌。
4.根据权利要求1所述的突变微生物,其中,甘油的氧化途径被阻断。
5.一种制备具有产生3-羟基丙酸高能力的突变微生物的方法,其特征在于,在具有产生辅酶B12能力且具有能够以甘油作为碳源而产生3-羟基丙酸的能力的微生物中,插入或扩增丙二醇利用蛋白编码基因。
6.根据权利要求5所述的方法,其中,所述丙二醇利用蛋白编码基因是罗伊乳杆菌(Lactobacillus reuteri)的丙二醇利用蛋白编码基因(PduP)。
7.根据权利要求5所述的方法,其中,所述具有产生辅酶B12能力且具有能够以甘油作为碳源而产生3-羟基丙酸的能力的微生物是肺炎克雷伯菌。
8.一种制备3-羟基丙酸的方法,所述方法包括:
(a)在含有甘油的培养基中,培养权利要求1至4中任一项所述的突变微生物,由此产生3-羟基丙酸的步骤;和
(b)回收所产生的1,3-丙二醇的步骤。
9.一种肺炎克雷伯菌突变株,其特征在于,在肺炎克雷伯菌中缺失甘油脱氢酶基因(DhaD)、转录激活因子基因(DhaR)、1,3-丙二醇氧化还原酶基因(DhaT)以及甘油脱水酶复活因子II基因(DhaBA2),并引入了1,3-丙二醇氧化还原酶编码基因、醛脱氢酶编码基因以及丙二醇利用蛋白基因。
10.根据权利要求9所述的肺炎克雷伯菌突变株,其中,所述丙二醇利用蛋白编码基因是罗伊乳杆菌(Lactobacillus reuteri)的丙二醇利用蛋白编码基因(PduP)。
11.根据权利要求9所述的肺炎克雷伯菌突变株,其中,所述肺炎克雷伯菌突变株是肺炎克雷伯菌AK-VOTLp(KCTC 11689BP)。
12.一种制备肺炎克雷伯菌突变株的方法,其特征在于,在肺炎克雷伯菌中使甘油脱氢酶基因(DhaD)、转录激活因子基因(DhaR)、1,3-丙二醇氧化还原酶基因(DhaT)以及甘油脱水酶复活因子II基因(DhaBA2)缺失,并将1,3-丙二醇氧化还原酶编码基因、醛脱氢酶编码基因以及丙二醇利用蛋白基因引入至肺炎克雷伯菌中。
13.一种制备3-羟基丙酸的方法,所述方法包括:
(a)在含有甘油的培养基中,培养权利要求9至11中任一项所述的肺炎克雷伯菌突变株,由此产生3-羟基丙酸的步骤;和
(b)回收所产生的3-羟基丙酸的步骤。
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