[发明专利]基于慢病毒载体的抗疟疾免疫化合物

说明书

本发明涉及基于慢病毒载体的抗疟疾免疫化合物。

鉴于在疫苗策略的设计中已观察到的妨碍，导致高死亡率和发病率的许多疾病例如疟疾仍然使得必需开发能够引发强T细胞介导的免疫和有利地强劲的体液免疫应答的新型疫苗平台。在影响人类的寄生虫感染中，已针对疟疾进行了许多尝试以获得此类疫苗。

然而，关于疟疾，只有包含辐照减毒的子孢子(sporozoite)的疫苗始终一致地在啮齿类动物(Nussenzweig R.S.等人,Nature 216,160-162(1967))、猴子(Gwadz；R.W.等人,Bull World Health Organ 57 Suppl 1,165-173(1979))和人(Clyde,D.F.等人,Am J.Med Sci 266,169-177(1973)中诱导杀菌免疫。虽然非常有趣，但在其可被认为有希望用于大规模接种之前，辐照子孢子疫苗法仍然需要克服许多挑战，特别是涉及安全、生产、贮存和分发的挑战。

在综述文章中，Limbach K.J.和Richie T.L.(Parasit immunology,2009,31,501-519)已考虑过不同的、可获得的抗疟疾疫苗平台，所述平台基于将病毒载体用作引发免疫应答的抗原的递送工具。此类平台包括基于以痘病毒为载体的(poxvirus-vectored)疟疾抗原或以腺病毒为载体(adenovirus-vectored)的疟疾抗原而设计的疫苗，两种类型的载体特别地都在牵涉异源引发-加强施用方案的方法中被提出。除了此类基于痘病毒或腺病毒的技术以外，该综述的作者还公开，相应地考虑到以黄热病病毒为载体的策略或以甲病毒复制子为载体的策略，新型载体系统在动物模型中可能是非常有前景的。他们还设想了各种潜在地令人感兴趣的方法来克服在设计疫苗载体(所述疫苗载体可在哺乳动物宿主中有效提供长效免疫并且满足给人类宿主施用所需的安全性要求)中持续存在的困难。此类方法包括抗原的异源递送方法的组合、佐剂或免疫调节组分的使用。

为了克服至少一些当测定提及的现有技术中的疫苗组合物时观察到的缺点，本发明人已考虑了这样的方法，其以慢病毒载体为新型接种平台的基础，以期开发抗疟疾的预防性疫苗。

疟疾为由按蚊属(Anophele)蚊子传播给宿主的疾病并且在许多国家为地方病，其在这些国家中每年造成数百万人的死亡。除死亡率外，疟疾在其为地方病的国家中在很大一部分群体中引发疾病，从而引起了这些国家的医学和经济学关注。

已知疟原虫属(Plasmodium)寄生虫的5个种感染人：间日疟原虫(Plasmodium vivax)、卵形疟原虫(Plasmodium ovale)、三日疟原虫(Plasmodium malariae)、诺氏疟原虫(Plasmodium knowlesi)(17)和恶性疟原虫(Plasmodium falciparum)，后者为引起几乎全部死亡案例的疟疾病原体。人的感染始于源自雌蚊的子孢子形式的寄生虫的接种。这些形式的寄生虫被快速地从血流转移至人宿主的肝脏，在肝脏中它们继续侵入肝细胞。取决于疟原虫的株系，寄生虫的肝内周期的持续时间为5至15天，恶性疟原虫的肝内周期持续时间较短(约5.5天)。由于在感染的细胞中的无性复制，寄生虫在肝脏中扩增，产生了裂殖子形式的寄生虫。在裂殖子从肝细胞释放后，它们继续向相应于人宿主的感染的症状期的血液阶段感染(blood-stage infection)进展。因此，裂殖子快速地通过特定的膜受体渗入红细胞(红血球)。红细胞的裂殖子侵入相应于周期的红内期，其持续48至72小时(取决于疟原虫的株系)。在该阶段中，裂殖子经历多次核分裂，导致更多裂殖子的释放，所述裂殖子能够侵入其它红细胞，从而重复周期。在人中，症状性疾病为红细胞侵入效应，红细胞破坏和宿主应答的结果。在感染过程中，一些寄生虫形式分化(differenciate)为配子母细胞，其随后被蚊子摄入，并且在蚊子中它们经历孢子生殖周期(sporogonic cycle)，产生随后感染人的子孢子。

由于感染周期包括在人体中的不同阶段和寄生虫的不同形式，因此已提出各种策略，以递送疫苗物质，并且疟原虫的各种抗原已被提出作为免疫应答的靶，特别是当需要体液抗体应答时。

适用于引起或促进免疫应答的靶候选物可包括各种抗原(以期设计疫苗)，并且因此包括“肝期(liver-stage)抗原”(也称为“红细胞前期(pre-erythrocytic stage)抗原”)和/或“血液阶段抗原”。