[发明专利]青光眼的诊断方法

说明书

发明领域

本发明属于医学诊断领域，特别涉及基于自身免疫反应性的分析来诊断青光眼的方法。本发明包括两种青光眼诊断方法。第一种和第二种诊断方法都依靠青光眼患者体液中的自身免疫反应性。本发明的另一方面涉及调节青光眼患者自身免疫反应性的治疗方法。 

第一种青光眼的诊断方法是基于体液抗至少部分纯化的眼部抗原的自身免疫反应性的分析。第二种青光眼的诊断方法是基于体液中自身抗体对体外培养的视网膜神经节细胞（RGC）蛋白质表达的影响的分析。 

发明背景

青光眼是一类以进行性丧失视网膜神经节细胞及其轴突，以及逐渐丧失视野为特征的眼部疾病。它是世界上导致失明的主要原因之一。青光眼在欧洲的普通人群中的患病率达到约1-2%。超过60岁的人群中高达3-4%受该病影响。青光眼最常见的类型是原发性开角型青光眼（POAG），患病率为1.1%到2%。 

仅部分理解青光眼的发病机制，眼内压的升高并不是导致该疾病的唯一因素。仍认为升高的眼内压是一个主要的风险因素，但是其他的致病因素，如细胞凋亡过程、一氧化氮水平升高或者免疫系统的参与都可能是相关的。 

此外，眼内压的升高是非常普遍的（占40岁人群的10%），然而只有一些人在几年后患上青光眼。到目前为止，没有标准的诊断测试可以确定哪些眼内压升高的人会患上青光眼。由于青光眼的早期治疗对防止视力丧失是至关重要的，因此需要一种改进的诊断工具，可以不依赖于眼内压升高而在早期检测出青光眼。 

已知眼内压的升高是导致视网膜细胞死亡和青光眼发病的主要原因。已经在体外模拟压力的升高导致细胞死亡。Agar等（Brain Res.2006.1086(1):p.191-200）将视网膜神经节细胞的体外培养物暴露于升高的静水 压力中，诱发了细胞死亡。 

然而，已知约30%的青光眼病例并未伴随眼内压升高。至少一些类型的青光眼疾病与神经退行性疾病的模式相吻合，该类疾病的神经系统出现进行性机能失调并且受影响的外周或中枢神经系统结构进行性萎缩。因此，需要讨论除眼内压升高之外的其它导致视网膜神经节细胞破坏的原因和机制，如一氧化氮水平的升高或者T-细胞介导的过程或者自身的免疫攻击。 

青光眼的早期检测方法仍然是有限的。测量眼内压可以检测一些患者，但是压力水平的波动可能导致假阴性结果。当患者意识到视力丧失时，在大多数情况下视网膜神经节细胞已经发生了严重的不可逆转的缺陷。 

大致30%的青光眼病例没有伴随眼内压的升高，称之为正常眼压性青光眼。传统的检测眼内压升高的方法对这些患者无效。考虑到缺少正常眼压性青光眼的诊断方法以及缺少早期青光眼的检测方法，开发一种不依赖眼内压升高的青光眼检测方法是非常必要的。多个研究表明血清抗体抗眼部抗原，从而证明自身免疫是青光眼的一个重要因素。例如，与健康受试者相比，热休克蛋白HSP27、HSP60、α-B-晶状体蛋白，γ-烯醇化酶,α-胞衬蛋白、谷胱甘肽-S-转移酶和糖胺聚糖在青光眼患者中具有不同水平的结合反应性（例如Joachim,S.C.等人,Curr.Eye Res.2007,32(6):p.501-9）。有趣的是，青光眼患者的体液的特征是不仅可能具有自身攻击性影响的抗体反应性升高，而且对某些抗原的自身免疫反应性降低。此外，还显示在细胞培养方法中直接施用抗-HSP抗体可以导致视网膜神经节细胞的凋亡（Tezel G等人.Invest Ophthalmol.Vis.Sci.1998;39:2277-2287）。