[发明专利]2’-O-岩藻糖基乳糖的多晶型物及其制备

说明书

发明领域

本发明提供三糖2-FL的新的多晶型物、其制备以及包含其的制剂。

发明背景

近年来，对于包括分泌寡糖在内的复杂碳水化合物的合成的商业化努力，由于它们在活有机体中发生的大量生物学过程中的作用而显著增多。分泌的寡糖如人乳寡糖正在成为用于营养和治疗工业的重要商业靶标。然而，这些寡糖和它们的中间体的合成和纯化仍然是有挑战性的科学任务。最重要的人乳寡糖中的一种是在母乳中以最高浓度发现的2’-O-岩藻糖基乳糖(2-FL，见式1)。

式1

已经提出了2’-O-岩藻糖基乳糖的多种生物学作用，包括但不限于它的益生作用、抗细菌作用、抗病毒作用、免疫系统增强作用、大脑发育增强作用等，使其成为用于营养和治疗工业的大规模制备/分离/纯化的有吸引力靶标。

文献中对2’-O-岩藻糖基乳糖的第一次提及出现于20世纪50年代，Kuhn等(Chem.Ber.1955，88，1135；ibid.1956，89，2513)。根据Kuhn的方法，将分离自母乳的糖浆状或无定形2-FL溶解在热的75％甲醇中，并且在有晶种存在下逐渐加入无水乙醇。晶种以两种方式制备：在“延长的”存储后，一些小晶体在容纳有糖浆状2-FL的烧瓶的壁附近沉淀，或者在“几”周后，2-FL在4℃从由含水甲醇、正丁醇和正己醇组成的溶液中沉淀出来。由此获得的结晶2-FL的熔点为230-231℃(发生分解)，不含有结构水(constitutional water)并且被认为是α型。

在那时，特定人乳寡糖通过使用复杂的色谱方案(主要是纸色谱法)从人乳分离。然而，这样的早期分离的样品的纯度相当不确定，原因在于大量的人乳寡糖异构体存在于母乳中以及缺乏如今在这样的复杂任务的研究和解决中是常见的高性能色谱技术。例如，2’-O-岩藻糖基乳糖和3-O-岩藻糖基乳糖都存在于人乳中，而它们的色谱分离在数十年后才被解决。虽然2-FL在1956年被Kuhn报道为结晶化合物，但是由于以上提及的考虑因素，分离的样品的纯度相当不清楚。此外，自该出版物以来，在本领域中没有发现关于2-FL的结晶存在或出现的其他证据、参考文献或指示，因此2-FL通常作为无定形(冻干)固体可得到并使用。

结晶或再结晶是用于从污染物分离产物并获得纯物质的最简单且最廉价方法之一。此外，提供固体的一种或多种结晶变体(多晶型物)是产品开发中的重要因素，因为不同结晶形式不同地影响化合物的性质-例如热力学稳定性、溶解性、密度、吸湿性、电性质(如介电常数、电导率)、机械性质(如脆性、硬度、抗断强度、弹性)、光学性质(如颜色、透明度、折射)等。其扩充了科学家可用于改善产品特性的材料的清单。对于2-FL，仍需要可以简化迄今遇到的分离、纯化和配制问题的结晶产物。

发明内容

本发明提供结晶2’-O-岩藻糖基乳糖多晶型物和适于大规模纯化2’-O-岩藻糖基乳糖的方法。因此，本发明提供的结晶产物可用于开发用于营养和药物工业的高纯度2’-O-岩藻糖基乳糖。

附图说明

在下文将参考附图更详细地描述本发明，其中：

图1显示根据实施例A、项目1的结晶2’-O-岩藻糖基乳糖多晶型物I的X射线粉末衍射图。

图2显示根据实施例C的结晶2’-O-岩藻糖基乳糖多晶型物I的X射线粉末衍射图。

图3显示根据实施例D的结晶2’-O-岩藻糖基乳糖多晶型物I的X射线粉末衍射图。

图4显示来自对于CuKα辐射的2’-O-岩藻糖基乳糖多晶型物I的单晶结构的经计算的X射线粉末衍射图。

图5显示不同的结晶2’-O-岩藻糖基乳糖多晶型物I样品的X射线粉末衍射图的比较。1：实施例A，项目1；2：从多晶型物I单晶计算的衍射图；3：实施例D；4：实施例C。

图6显示2’-O-岩藻糖基乳糖多晶型物I的单晶结构。

图7显示结晶2’-O-岩藻糖基乳糖多晶型物I的IR光谱。

图8显示根据实施例A、项目1的结晶2’-O-岩藻糖基乳糖多晶型物I的DSC热谱。

图9显示根据实施例C的结晶2’-O-岩藻糖基乳糖多晶型物I的DSC温谱图。

图10显示根据实施例A、项目1的2’-O-岩藻糖基乳糖多晶型物I的固态¹³C-NMR谱。

图11显示根据实施例C的2’-O-岩藻糖基乳糖多晶型物I的固态¹³C-NMR谱。