[发明专利]靶向VEGFA的siRNA及用于体内治疗的方法

权利要求书

1.用于降低VEGFA体内表达的方法，包括给予对象siRNA，其中所述siRNA包含选自如下的序列：SEQ ID NO:2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22、24、26、28、30、32、34、36、38、40、42、44、46、48、50、52、54、56、58、60、62、64、66、68、70、72、74、76、78、80、82、84、86和88。

2.权利要求1的方法，其中所述对象是哺乳动物。

3.权利要求2的方法，其中所述对象是人。

4.权利要求1的方法，其中所述siRNA由双链区组成，所述双链区长度为17-30碱基对并且是无突出端区、一个突出端区或者两个突出端区，其中每个突出端区有6个或更少的碱基。

5.权利要求1的方法，其中所述siRNA是具有长度为17-30碱基对的双链区的shRNA。

6.权利要求1的方法，其中所述siRNA包含：(a)有义链；及(b)反义链，其中每个所述有义链和所述反义链的长度为19-36个核苷酸，并且反义链包含选自SEQ ID NO:2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22、24、26、28、30、32、34、36、38、40、42、44、46、48、50、52、54、56、58、60、62、64、66、68、70、72、74、76、78、80、82、84、86和88的序列。

7.权利要求6的方法，其中：

(a)在有义链内，位置1和2的核苷酸、所有C核苷酸和所有U核苷酸具有2’-O-甲基修饰，并且有义链的所有其它核苷酸具有2’OH基团；以及

(b)在反义链内，所有C核苷酸和所有U核苷酸具有2’氟修饰，并且反义链的所有其它核苷酸具有2’OH基团，以及在反义链位置1的核苷酸是5’磷酸化的。

8.权利要求7的方法，其中反义链的两个最3’端的碱基是UU。

9.权利要求8的方法，其中所述反义链长度是21个碱基。

10.权利要求9的方法，其中所述有义链的长度是19个碱基，并且所述反义链与有义链形成长度为19个碱基对的双链区。

11.权利要求6的方法，其中所述siRNA还包含与有义链的3’末端附着的胆固醇部分，并且所述胆固醇部分通过C5接头附着，以及其中所述双链区在有义链的位置6、13和19含有错配，其中所述位置是相对于有义链的5’末端限定的，并且所述有义链不含有5’突出端区。

12.权利要求7的方法，其中所述siRNA还包含与有义链的3’末端附着的胆固醇部分，并且所述胆固醇部分通过C5接头附着，以及其中所述双链区在有义链的位置6、13和19含有错配，其中所述位置是相对于有义链的5’末端限定的，并且所述有义链不含有5’突出端区。

13.权利要求12的方法，其中所述反义链长度为21个碱基。

14.权利要求13的方法，其中所述有义链的长度为19个碱基，并且所述反义链与有义链形成长度为19个碱基对的双链区。

15.权利要求14的方法，其中所述反义链包含SEQ ID NO:54。

16.权利要求15的方法，其中有义链内在位置6、13和19的所述错配的核苷酸是与反义链上相对的核苷酸相同的碱基。

17.药物组合物，其包含治疗有效量的siRNA，其中所述siRNA包含：

(a)反义链，其长度为19-36个碱基，并具有选自SEQ ID NO:2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22、24、26、28、30、32、34、36、38、40、42、44、46、48、50、52、54、56、58、60、62、64、66、68、70、72、74、76、78、80、82、84、86和88的序列，

(b)有义链，其长度为19-36个碱基，其中所述反义链与有义链形成17-30个碱基对的双链区，并且双链区内至少75%是互补的。

18.权利要求17的药物组合物，其中在双链区内，在位置6、13或19中的一或多个位置存在错配，其中所述位置是相对于有义链的5’末端限定的。