[发明专利]具有改善的稳定性的基于纤连蛋白的支架蛋白质

权利要求书

1.一种包含纤连蛋白III型第10(¹⁰Fn3)域的多肽，其中所述¹⁰Fn3域包含与SEQ ID NO:1具有至少60%同一性的氨基酸序列，并且以小于100nM的K_D结合靶分子，且其中所述¹⁰Fn3域进一步包含不含有DK序列的C端尾。

2.权利要求1的多肽，其中所述C端尾包含SEQ ID NO:4的氨基酸序列。

3.权利要求1或2的多肽，其中所述C端尾还包含半胱氨酸残基。

4.权利要求3的多肽，其中所述C端尾包含SEQ ID NO:5的氨基酸序列。

5.权利要求1-4中任一项的多肽，其中所述¹⁰Fn3域还包含含有1-10个氨基酸的N端延伸。

6.权利要求5的多肽，其中所述N端延伸包含选自下组的序列：M,MG,G,以及SEQ ID NO:19-21和26-31中的任意者。

7.权利要求1-6中任一项的多肽，还包含第二¹⁰Fn3域，其中所述第二¹⁰Fn3域包含与SEQ ID NO:1具有至少60%同一性的氨基酸序列，并且以小于100nM的K_D结合靶分子，且其中所述第二¹⁰Fn3域还包含不含有DK序列的C端尾。

8.权利要求7的多肽，其中所述第二¹⁰Fn3域包含含有SEQ ID NO:4的氨基酸序列的C端尾。

9.权利要求7或8的多肽，其中所述第一¹⁰Fn3域和第二¹⁰Fn3域结合不同的靶物。

10.权利要求7-9中任一项的多肽，其中所述第二¹⁰Fn3域还包含含有1-10个氨基酸的N端延伸。

11.权利要求10的多肽，其中所述N端延伸包含选自下组的序列：SEQ ID NO:19-21和26-31。

12.权利要求7-11中任一项的多肽，其中所述第一¹⁰Fn3域和第二¹⁰Fn3域通过包含1-30个氨基酸的多肽接头连接。

13.权利要求12的多肽，其中所述多肽接头选自下组：基于甘氨酸-丝氨酸的接头，基于甘氨酸-脯氨酸的接头，基于脯氨酸-丙氨酸的接头，以及基于Fn的接头。

14.一种多肽，其包含SEQ ID NO:48的氨基酸序列。

15.一种多肽，其包含具有下列结构的氨基酸序列：

N1-D1-C1-L-N2-D2-C2,

其中N1和N2为独立地含有0-10个氨基酸的任选的N端延伸；

其中D1和D2独立地选自下组：(i)与SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列具有至少95%同一性的纤连蛋白III型第10结构域(¹⁰Fn3)域，其中所述¹⁰Fn3域以小于500nM的K_D结合IGF-IR，和(ii)与SEQ ID NO:3所示的氨基酸序列具有至少95%的同一性的¹⁰Fn3域，其中所述¹⁰Fn3域以小于500nM的K_D结合VEGFR2；

其中L为包含0-30个氨基酸残基的多肽接头；

其中C1包含SEQ ID NO:4的氨基酸序列；且

其中C2包含SEQ ID NO:4、5或6的氨基酸序列。

16.权利要求15的多肽，其中D1是与SEQ ID NO:2中所示氨基酸序列具有至少95%同一性的¹⁰Fn3域，且其中D2是与SEQ ID NO:3中所示氨基酸序列具有至少95%同一性的¹⁰Fn3域。

17.权利要求15的多肽，其中D1是与SEQ ID NO:3中所示氨基酸序列具有至少95%同一性的¹⁰Fn3域，且其中D2是与SEQ ID NO:2中所示氨基酸序列具有至少95%同一性的¹⁰Fn3域。