[发明专利]无血培养的脓毒血症质谱诊断

权利要求书

1.一种鉴定体液中微生物的方法，包含以下步骤：

a)溶解体液中的人体细胞；

b)从体液中分离微生物；

c)在培养基中培养微生物；

d)从培养基中分离微生物；

e)通过对微生物蛋白质谱与参比谱图的类似性分析来鉴定微生物。

2.根据权利要求1所述的方法，其中体液为血液。

3.根据权利要求1所述的方法，其中体液为淋巴液、滑液、脑脊液或匀浆组织。

4.根据权利要求1-3之一所述的方法，其中在步骤a)中采用一种表面活性剂溶解人体细胞。

5.根据权利要求4所述的方法，其中溶解人体细胞的方法包含一种皂苷溶液，其中添加有泡沫抑制剂。

6.根据权利要求1-5之一所述的方法，其中在步骤b)后研究是否分离微生物，仅当已检测到微生物时方可进行步骤c)。

7.根据权利要求1-6之一所述的方法，其中在步骤c)中微生物培养仅在不到1ml的培养基中进行。

8.根据权利要求1-7之一所述的方法，其中在步骤c)中微生物培养过程中监测微生物定量生长。

9.根据权利要求8所述的方法，其中仅当监测提示具有足够用于质谱鉴定数量的微生物时，方进行步骤c)中的微生物培养。

10.根据权利要求8或9所述的方法，其中监测微生物定量生长的方法包含测量消光、散射光或荧光的方法。

11.根据权利要求10所述的方法，其中监测培养皿中微生物定量生长的方法包含测量荧光的方法，其中培养基包含一种物质，其被微生物降解或吸附至微生物上可产生一种可测量的荧光或荧光波长发生可测量的改变。

12.根据权利要求1-11之一所述的方法，其中采用SDS(十二烷基硫酸钠)步骤d)中从培养基中分离得到的微生物上的外源蛋白。

13.根据权利要求1-12之一所述的方法，其中对于步骤e)中的质谱采集，通过基质辅助激光解吸(MALDI)方法电离微生物蛋白。

14.根据权利要求1-13之一所述的方法，其中一部分在培养基中生长的微生物用于测试其对抗生素的耐药性。

15.用于实施根据权利要求1-15之一所述的方法的培养皿，适合通过离心分离微生物。

16.根据权利要求15所述的一种装置，其允许通过外部测量装置监测培养期间微生物的生长情况。

17.步骤a)中根据权利要求13或16所述的培养皿经预真空化，可灌入体液，并含有一种表面活性剂、泡沫抑制剂和溶解人体颗粒的抗凝剂的溶液。

18.试剂盒包装，包含根据权利要求15-17之一所述的即用型培养皿和即用型培养基。