[发明专利]抗MHC抗体抗病毒性细胞因子融合蛋白

说明书

发明领域

本发明涉及包含抗体和抗病毒细胞因子的融合蛋白和使用所述融合蛋白的方法，所述抗体结合呈递乙肝病毒蛋白的肽片段的人主要组织相容性复合物。该融合蛋白可用于治疗病毒感染，例如乙肝病毒感染。

背景

HBV对I型和II型干扰素的抗病毒效应敏感，但由于慢性HBV与受抑制的抗病毒性先天性和适应性免疫应答相关，所以在慢性HBV感染过程中，这些细胞因子的功效被降低。为了规避这些免疫缺陷并增加当前的干扰素疗法对慢性HBV感染的功效，我们创造了新的工具，所述工具以抗肝抑制形式组合了HBV特异的CD8T细胞精致的特异性和细胞因子的抗病毒效应。

干扰素，特别是干扰素2α，是具有抗病毒和抗增殖活性的药物活性蛋白质。例如，干扰素用于治疗多毛细胞白血病和卡波西肉瘤，且对肝炎是有活性的。为了改进稳定性和溶解度，并降低免疫原性，可以将药物活性蛋白质如干扰素与聚合物聚乙二醇(PEG)缀合(参见EP0809996)。

Noy，R.等人报道了T细胞受体样抗体是用于临床癌免疫学和免疫治疗的新的试剂(Expert Review of Anticancer Therapy5(2005)523-536)。

在WO2009/136874中报道了HBV表位反应性的外源性T细胞受体(TCR)及其用途。

Sastry，K.S.等人报道了靶向HBV感染的肝细胞的T细胞受体样抗体(J.Hepatol.52(2010)S5-S6)。在WO03/068201中报道了具有T细胞受体样特异性的更高亲和力的抗体，及其在检测和治疗癌症、病毒感染和自身免疫病中的用途。在WO2005/077980中报道了可溶的TCR样分子及其用途。在WO2009/136874中报道了HBV表位反应性的外源性T细胞受体(TCR)及其用途。

概述

已经发现本文报道的融合蛋白可以用比裸露的或PEG化的干扰素更高的效价将干扰素-α递送至HBV感染的靶细胞。本文报道的融合蛋白是新的定向治疗递送平台，以提供具有潜在降低的干扰素的多效性效果的用于HBV感染患者的治疗。

本发明提供了融合蛋白，其包含结合呈递乙肝病毒蛋白的肽片段的人主要组织相容性复合物的抗体和细胞因子。在一个实施方案中，细胞因子是抗病毒细胞因子。

在一个实施方案中，乙肝病毒蛋白是乙肝病毒包膜(env)蛋白或乙肝病毒核心蛋白。

在一个实施方案中，乙肝病毒蛋白是乙肝病毒包膜(表面)蛋白，并且肽片段对应于其氨基酸残基的第172至180位，或乙肝病毒蛋白是乙肝病毒包膜(表面)蛋白，肽片段对应于其氨基酸残基的第183至191位，或乙肝病毒蛋白是乙肝病毒核心蛋白，肽片段对应于其氨基酸残基的第18至27位。在一个实施方案中，肽片段具有SEQ ID NO：01的氨基酸残基第172至180位的氨基酸序列，或具有SEQ ID NO：01的氨基酸残基第182至190位的氨基酸序列，或具有SEQ ID NO：02的氨基酸残基第18至27位的氨基酸序列。在一个实施方案中，肽片段具有SEQ ID NO：30的氨基酸序列，或肽片段具有SEQ ID NO：31的氨基酸序列。

在一个实施方案中，抗体特异地结合感染了乙肝病毒的对象的肝细胞。

在一个实施方案中，抗病毒细胞因子是干扰素。在一个实施方案中，抗病毒细胞因子是天然存在的抗病毒细胞因子的变体。在一个实施方案中，变体是天然存在的细胞因子截短的形式或具有共有的氨基酸序列的抗病毒细胞因子。在另一个实施方案中，抗病毒细胞因子选自I型干扰素，或II型干扰素，或III型干扰素。在一个实施方案中，干扰素是人干扰素α-2a。在另一个实施方案中，抗病毒细胞因子是人干扰素α-2a截短的变体。在一个实施方案中，干扰素具有SEQ ID NO：03的氨基酸序列，或是其片段，所述片段具有SEQ ID NO：03的多肽可比较的生物学活性。

在一个实施方案中，融合蛋白具有与携带CD8的T细胞相同的特异性。

在一个实施方案中，抗体不被血清乙肝病毒抗原抑制。

在一个实施方案中，抗体是单克隆抗体。

在一个实施方案中，抗体是人、人源化或嵌合的抗体。

在一个实施方案中，抗体是结合呈递乙肝病毒蛋白的肽片段的人主要组织相容性复合物的抗体片段。

在一个实施方案中，细胞因子与抗体的轻链或重链的N端或C端融合。在一个实施方案中，细胞因子与抗体的重链C端融合。