[发明专利]使用嵌合性嗅觉受体产生cAMP的方法有效

专利信息
申请号: 201180040664.5 申请日: 2011-10-24
公开(公告)号: CN103097408A 公开(公告)日: 2013-05-08
发明(设计)人: 铃木雅登;冈弘章;清中茂树;森泰生 申请(专利权)人: 松下电器产业株式会社
主分类号: C07K14/705 分类号: C07K14/705;C07K19/00;C12Q1/02;C12N15/09
代理公司: 永新专利商标代理有限公司 72002 代理人: 白丽;陈建全
地址: 日本*** 国省代码: 日本;JP
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摘要:
搜索关键词: 使用 嵌合 嗅觉 受体 产生 camp 方法
【权利要求书】:

1.一种使用嵌合性嗅觉受体产生cAMP的方法,其具备以下的工序:

准备具备第1层、脂质双层膜及第2层的反应体系的工序(a),

这里,所述脂质双层膜被所述第1层及所述第2层夹持,

所述脂质双层膜具备所述嵌合性嗅觉受体及腺苷酸环化酶,

所述嵌合性嗅觉受体贯穿所述脂质双层膜,

所述腺苷酸环化酶贯穿所述脂质双层膜,

所述第2层含有ATP及G蛋白,

所述G蛋白配置在所述嵌合性嗅觉受体的一端附近,

所述嵌合性嗅觉受体来自于由(N末端)-EC1结构域-TM1结构域-IC1结构域-TM2结构域-EC2结构域-TM3结构域-IC2结构域-TM4结构域-EC3结构域-TM5结构域-IC3结构域-TM6结构域-EC4结构域-TM7结构域-IC4结构域-(C末端)的氨基酸序列所构成的小鼠来源的嗅觉受体,

所述嵌合性嗅觉受体的N末端被Rho标签(序列号01)-myc附加表位(序列号04)的氨基酸序列修饰,并且

所述IC4结构域被置换成β1肾上腺素能受体的IC4结构域;以及

将刺激所述嵌合性嗅觉受体的化学物质供至所述第1层以由所述ATP产生cAMP的工序(b)。

2.根据权利要求1所述的方法,其中,所述小鼠来源的嗅觉受体为小鼠来源的丁子香酚识别嗅觉受体,所述化学物质为丁子香酚。

3.根据权利要求1所述的方法,其中,所述小鼠来源的嗅觉受体为小鼠来源的嗅觉受体Olfr168,所述化学物质为2-戊酮。

4.根据权利要求1所述的方法,其中,所述小鼠来源的嗅觉受体为小鼠来源的嗅觉受体Olfr15,所述化学物质为环己酮。

5.根据权利要求1所述的方法,其中,所述小鼠来源的嗅觉受体为小鼠来源的嗅觉受体Olfr609,所述化学物质为香草酸。

6.根据权利要求2所述的方法,其中,所述嵌合性嗅觉受体由序列号36所表示的氨基酸序列构成。

7.根据权利要求3所述的方法,其中,所述嵌合性嗅觉受体由序列号51所表示的氨基酸序列构成。

8.根据权利要求4所述的方法,其中,所述嵌合性嗅觉受体由序列号60所表示的氨基酸序列构成。

9.根据权利要求5所述的方法,其中,所述嵌合性嗅觉受体由序列号69所表示的氨基酸序列构成。

10.根据权利要求1所述的方法,其中,

所述G蛋白具备Gαolf、Gβ及Gγ,

在所述工序(b)中,所述G蛋白分离为所述Gαolf及复合体,

所述复合体由所述Gβ及所述Gγ构成,并且

所述Gαolf将所述腺苷酸环化酶活化。

11.根据权利要求1所述的方法,其中,

所述脂质双层膜还具备离子通道,

所述离子通道贯穿所述脂质双层膜,并且

所述工序(b)中产生的所述cAMP将所述离子通道活化。

12.根据权利要求11所述的方法,其中,所述离子通道为钙离子通道。

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