[发明专利]使用来自细胞的微泡治疗和诊断癌症的方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种使用来自细菌细胞的微泡，治疗癌症和/或诊断癌症的方法。特别地，本发明涉及一种使用来自细菌细胞的微泡的组分治疗癌症的方法。

背景技术

在1813年，Vautier报道了在同时患有厌氧细菌产气荚膜梭菌感染引起的气性坏疽的患者中癌症的明显治愈。自那时起，对于有意注射各种细菌进行了广泛研究，所述细菌除了梭菌之外，还包括鼠伤寒沙门氏菌，即细菌介导的癌症治疗的概念。当癌细胞生长超过一定大小（大约1mm³）时，其经受周围血管的氧气供应不足，形成癌组织内缺氧。缺氧状态下的癌组织提供了厌氧细菌容易增殖的环境，同时其可能使用各种毒素和/或通过未知机制攻击周围癌细胞至坏死。已进行了各种尝试以增强细菌介导的癌症治疗。例如，细菌被转化以表达抗癌蛋白质，或用于递送携带抗癌蛋白质基因的质粒至癌组织。为了减轻由细菌增殖和毒素产生的副作用，也尝试将营养缺陷型突变体、孢子和减毒细菌用于癌症治疗。尽管这些努力，但在癌症治疗中使用细菌一直存在癌症周围的正常组织或器官中细菌增殖的风险。

广义上细菌中具有两种不同类型的细胞壁，称为革兰氏阳性和革兰氏阴性。已知革兰氏阴性菌，诸如大肠杆菌、脑膜炎奈瑟氏菌、绿脓假单胞菌和福氏志贺氏菌自发地从外膜脱落微泡。来自革兰氏阴性菌细胞脱落的微泡被称为外膜囊泡，通常由脂质双分子层组成。通常其为大小为20～200nm的球状，并具有各种生物活性物质，诸如脂多糖(LPS)和外膜蛋白、脂质和遗传物质（DNA，RNA），其影响宿主细胞的炎症反应。来自细菌细胞脱落的微泡用作信息载体，其在同源细胞之间的蛋白质或遗传物质输送中及细胞至细胞的信号传导中起重要作用，并有助于竞争生物体的去除或细菌的存活。此外，脱落的微泡将毒素传递至宿主，因此部分地解释了细菌性疾病的病原学。在死于严重败血症的患者血液中发现脱落的微泡的报道表示脱落的微泡在败血症的病理学中起重要作用，败血症的特征是全身性炎症反应。发现来自细菌细胞脱落的微泡刺激宿主细胞分泌炎症性细胞因子和凝结剂的研究也支持上述观点。

本发明人首次发现，革兰氏阳性菌，包括枯草芽孢杆菌和金黄色葡萄球菌产生脱落的微泡。然而，还需要更多关于来自革兰氏阳性菌细胞脱落的微泡的组分或功能的信息。

已分离并观察到从各种细菌种类自发脱落的微泡。通常，通过过滤或超速离心从细胞培养物中分离脱落的微泡。此外，已知可用抗生素（诸如庆大霉素）控制脱落的微泡的产生。特别地，建议通过清洁剂处理制备脱落的微泡可能应用为抗脑膜炎奈瑟氏菌（一种细菌性病原体）感染的疫苗。然而，这些生产方法的容量受到严格限制。

尽管癌症和细菌之间的关系，但迄今为止未报道来自细菌细胞脱落的微泡在癌症发病及发展中的作用，特别地，未报道应用来自细菌细胞脱落的微泡治疗癌症和/或诊断癌症。

发明内容

技术问题

根据本发明，本发明人彻底深入的研究发现包含来自细菌或转化细菌的微泡的组合物能有效地抑制癌细胞的生长。

因此，本发明提供了一种使用来自细菌细胞的微泡治疗癌症和/或诊断癌症的方法，其在癌症治疗中卓有成效并显著减少副作用，及一种使用负载药物的来自细菌细胞的微泡，递送治疗或诊断疾病药物的方法，从而有效并特异性地治疗和诊断疾病。

然而，本发明所要达到的目的不限于上述，因此本领域技术人员将理解，可从以下描述中清楚地理解其他目的。

技术方案

根据一方面，本发明涉及用于治疗癌症和/或诊断癌症的药物组合物，其包含来自细菌细胞的微泡。本发明中使用的细菌可来自革兰氏阳性或革兰氏阴性菌，且其可以是天然的或基因转化的。该组合物还进一步包含中和微泡毒性的药物、提高抗癌活性的药物、负载这种药物的纳米颗粒治疗剂和/或细胞治疗剂。

所述纳米颗粒治疗剂是大小为10nm至10μm的颗粒，且其实例包括，但不限于，脂质体、树枝状大分子、聚合物和微泡。

根据另一方面，本发明涉及一种治疗癌症和/或诊断癌症的方法，其包括向需要的受试者施用来自细菌细胞的微泡。所述微泡可与中和微泡毒性的药物、提高抗癌活性的药物、负载这种药物的纳米颗粒治疗剂和/或细胞治疗剂一起同时/顺序地施用。

根据还一方面，本发明涉及一种用于治疗癌症和/或诊断癌症的来自细菌细胞的微泡的制备方法。在本发明的制备方法中，所述来自细菌细胞的微泡可以是从细菌自发脱落的微泡或人工微泡。