[发明专利]疫苗

说明书

发明领域

本发明涉及可用作针对顶复门(apicomplexan)寄生物的疫苗或疫苗组分的多肽或核酸。

发明背景

原生动物门顶复门(Apicomplexa)含有医学和兽医意义的病原体，包括刚地弓形虫(Toxoplasma gondii)和艾美球虫属(Eimeria)、疟原虫属(Plasmodium)和泰勒虫属(Theileria)物种。尽管经过几十年的努力，但是针对这些及其它相关寄生物的保护性疫苗是缺乏的。用于将真正免疫保护性抗原鉴定为疫苗候选物的经验办法已经实现混合的结果，并且区分免疫原性与实际免疫保护的问题持续。

如此，需要开发针对原生动物寄生物的改善的疫苗。

随着食物安全重要性增加，影响经济家禽(poultry)生产的病原体作为全球食物供应和人类贫穷的严重威胁再次出现。艾美球虫属物种寄生物具有全球地方性动物病分布，而且可以在所有家畜，最值得注意的是家禽中引起严重的肠病，其中估计每年费用在全世界超过20亿英镑。

英国家禽业(大约7.8亿只烤子鸡(broiler))的球虫感染总费用估计为每年至少4200万英镑，其中74%是由于对重量增加和饲料转化的亚临床影响所致，而24%是商业禽类的预防和疗法的成本(Williams,1999;A compartmentalized model for the estimation of the cost of coccidiosis to the world’s poultry production industry.International Journal for Parasitology,1209-1229)。

至今，集中饲养的家禽中艾美球虫属物种感染主要通过预防性喂入药物(尤其对于烤子鸡生产)控制。实际上，英国动物生产中使用的所有化学治疗剂的超过三分之一应用于控制艾美球虫属(http://www.vmd.gov.uk/)，但是抗性是普遍的，而且备选诸如用减毒的寄生物疫苗接种受限于需要包括多种艾美球虫属物种的活体型式、生产问题和成本。

如此，需要开发用于艾美球虫属物种寄生物的新的有成本效益的控制策略。

附图简述

图1：推定的顶复门免疫定位蛋白-1(Immune Mapped Protein,IMP-1)同源物。(a)来自巨型艾美球虫(Eimeria maxima)、柔嫩艾美球虫(Eimeria tenella)、刚地弓形虫(XM_002370108)和犬新孢子虫(Neospora caninum)(NCLIV_000430;GeneDB)的IMP-1内含子/外显子结构。(b)使用测序的翻译编码序列进行的全长IMP-1比对。

图2：巨型艾美球虫品系(strain)特异性性状。药物(罗贝胍(robenidine))和W品系特异性免疫对随后的H和W品系寄生物复制的影响和选择下品系特异性AFLP标志物(SS)在H/W杂合群体中的持续性。

图3：精细定位与对品系特异性免疫杀伤的易感性相关联的基因座1。(a)品系特异性AFLP标志物的分布在免疫选择下在BAC EmaxBAC8f18间丧失。一致的标志物(Solid marker)在选择下的六个回交世代后保持缺乏。(b)通过免疫选择的回交世代1-6回收品系特异性标志物，数字代表标志物第一次再现的世代，-=没有再现。(c)基因座1内鉴定的转录序列(ST=推定的磷酸盐转运蛋白,AMA-1=顶膜抗原1同源物,TEF=推定的转录延伸因子)。(d)通过用基因座1内鉴定的个别基因(与模拟免疫对照相比)、以携带转基因的巨型艾美球虫H呈现的候选物(与无转基因(T)相比)、重组蛋白(与单独的硫氧还蛋白(P)相比)或DNA(与仅载体(D)相比)疫苗接种免疫诱导的卵囊输出百分比降低。nd=未进行。以不同字母标记的柱形图是显著不同的(p<0.05)。