[发明专利]用于产生自组装蛋白质的高浓缩溶液的方法无效
申请号: | 201180051094.X | 申请日: | 2011-08-25 |
公开(公告)号: | CN103209991A | 公开(公告)日: | 2013-07-17 |
发明(设计)人: | E·克里莫夫;B·利布曼;T·萨布科夫斯基;M·莫勒;D·克里;A·达维登科;W·施密茨;G·沙尔芬贝格尔 | 申请(专利权)人: | 巴斯夫欧洲公司;卡尔弗罗伊登柏格两合公司 |
主分类号: | C07K14/435 | 分类号: | C07K14/435;D01D5/00 |
代理公司: | 北京市中咨律师事务所 11247 | 代理人: | 凌立;黄革生 |
地址: | 德国路*** | 国省代码: | 德国;DE |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 用于 产生 组装 蛋白质 浓缩 溶液 方法 | ||
1.稳定水性蛋白质分散体,其在水相中包含至少一种分散形式的自组装蛋白质和至少一种用于所述自组装蛋白质的分散剂,其中所述分散剂是选自两亲性蛋白质的聚合分散剂,或是选自两亲性肽片段和两亲性有机寡聚体的寡聚分散剂。
2.权利要求1的稳定水性分散体,其中所述自组装蛋白质是形成微球的蛋白质或本身未折叠的蛋白质,更具体而言是丝蛋白质,如蜘蛛丝蛋白质或昆虫蛋白质,或衍生自这些蛋白质中的至少一种,且具有至少约60%序列同一性的自组装类似物。
3.权利要求1或2的稳定水性分散体,其中所述自组装蛋白质选自:
a)包含SEQ ID NO:4的氨基酸序列的R16蛋白质;
b)包含SEQ ID NO:6的氨基酸序列的S16蛋白质;
c)衍生自这些蛋白质,且与SEQ ID NO:4或6具有至少约60%序列同一性的可纺丝的类似物蛋白质。
4.前述权利要求中任一项的稳定水性分散体,其中所述两亲性肽片段包含前体蛋白的片段。
5.前述权利要求中任一项的稳定水性分散体,其中所述聚合分散剂是白蛋白,更具体而言是牛血清白蛋白(BSA)或无脂肪牛血清白蛋白(ffBSA)。
6.权利要求4的稳定水性分散体,其中所述前体蛋白是白蛋白,更具体而言是牛血清白蛋白(BSA)或无脂肪牛血清白蛋白(ffBSA)。
7.权利要求4的稳定水性分散体,其中所述两亲性肽片段是权利要求2或3的自组装蛋白质的肽片段。
8.权利要求1的稳定水性分散体,其中所述两亲性有机寡聚体是包含醚结构单位,且包含至少一个疏水性醚寡聚体嵌段(具有疏水侧基)和至少一个亲水性醚寡聚体嵌段(具有亲水侧基)的嵌段共寡聚体。
9.前述权利要求中任一项的稳定水性分散体,其包含基于所述稳定分散体的总重的比例在1wt%至40wt%,优选5-20wt%的范围内的至少一种自组装蛋白质,可选地包含0.01wt%至50wt%,优选0.1wt%至10wt%的至少一种其他配制助剂或加工助剂。
10.前述权利要求中任一项的稳定水性分散体,其包含相对重量比在0.1∶1至1∶0.001的范围内的自组装蛋白质和分散剂。
11.用于产生前述权利要求中任一项的至少一种自组装蛋白质的稳定水性分散体的方法,所述方法包括将自组装蛋白质溶解在含有增溶剂(离液剂)的水性介质中,并在分散剂的存在下透析或超滤得到的溶液来从所述自组装蛋白质去除所述增溶剂(离液剂)。
12.权利要求11的方法,其中将自组装蛋白质和聚合分散剂的混合物溶解在含有离液剂的水性介质中,并从所述自组装蛋白质去除所述离液剂来形成所述稳定分散体,更具体而言,通过对不含离液剂的透析介质透析来去除所述离液剂,形成所述稳定分散体。
13.权利要求11的方法,其中将自组装蛋白质溶解在含有离液剂的水性介质中,并通过在去除所述离液剂前或去除所述离液剂期间加入两亲性肽片段或合成的两亲性寡聚体,从所述自组装蛋白质去除所述离液剂来形成所述稳定分散体。
14.权利要求11至13中任一项的方法,其中通过透析、超滤或沉淀来实现所述离液剂的去除。
15.权利要求13的方法,其中通过对含有至少一种两亲性肽片段或至少一种合成的两亲性寡聚体的透析介质(透析缓冲液)透析来实现所述离液剂的去除。
16.权利要求11至15中任一项的方法,其中将所述含有离液剂的水性介质换为缓冲水性介质。
17.权利要求16的方法,其中所述缓冲介质具有约10至12的范围内的pH。
18.权利要求14至17中任一项的方法,其中透析体积比待透析的含有离液剂和自组装蛋白质的水性介质的体积高至少100倍。
19.用于电纺丝自组装蛋白质的方法,所述方法包括电纺丝权利要求1至10中任一项的稳定水性分散体或按照权利要求11至18中任一项获得的稳定水性分散体。
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