[发明专利]人EZH2抑制剂及其应用方法

说明书

相关引用

本申请要求2010年9月10日提交的U.S.S.N 61/381,684的优先权及权益，其通过引用全文纳入本文。

技术领域

本发明涉及人组蛋白甲基转移酶EZH2的野生型和某些突变形式的抑制，所述EZH2是PRC2复合物的催化亚基，其催化在组蛋白H3上第27位赖氨酸(H3-K27)的单-至三-甲基化，还涉及用于治疗癌症的方法，所述癌症包括滤泡性淋巴瘤和弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)，以及用于测定对象中EZH2抑制剂响应的方法。

背景

在真核细胞中，DNA由组蛋白包装以形成染色质。约150个碱基对的DNA在组蛋白的八聚体(各两个组蛋白2A、2B、3和4)上缠绕两圈以形成核小体——染色质的基本单位。染色质的有序结构变化能引起关联基因转录中的改变。该过程高度受控，因为基因表达模式深度影响基础细胞过程，诸如分化、增殖和凋亡。通过共价修饰组蛋白，最特别是其N端尾部来介导对染色质结构变化(和因而的转录)的控制。这些修饰通常指表观遗传学修饰，因为它们能造成基因表达中的可遗传改变，但不影响所述DNA本身的序列。氨基酸侧链的共价修饰(例如，甲基化、乙酰化、磷酸化和泛素化)是酶促介导的。

通过称为组蛋白甲基转移酶(HMT)的独特酶家族作用来控制向组蛋白上特定氨基酸位点选择性添加甲基基团。具体基因的表达水平受相关的组蛋白位点处一个或多个甲基基团的存在与否影响。位于具体组蛋白位点的甲基基团的特定作用持续至所述甲基基团被组蛋白去甲基化酶移除，或持续至所述修饰的组蛋白通过核小体转换而被取代。以类似的方式，其它酶类能够用其它化学物质修饰DNA和组蛋白，并且其它酶也能移除这些物质来控制基因表达。

必须严格控制转录调节后生化系统的协调收集，以使细胞生长和分化最优进行。当这些控制受到负责DNA和组蛋白修饰的酶的异常表达和/或活性扰乱时，产生疾病状态。在人癌症中，例如，越来越多的证据提示，失调的表观遗传酶活性造成与癌症相关的细胞增殖失控，及其它癌症相关表型例如增强的细胞迁移和入侵。除了癌症外，有越来越多的证据显示表观遗传酶在众多其它人疾病中的作用，包括代谢疾病(例如糖尿病)、炎性疾病(例如克罗恩氏病(Crohn’s disease))、神经变性疾病(例如阿尔茨海默病)和心血管疾病。因此，选择性调节表观遗传酶的异常作用对治疗一定范围的疾病有广泛前景。

组蛋白甲基转移酶EZH2

已知多梳组(PcG)和三胸组(trxG)蛋白是细胞记忆系统的部分。Francis等.(2001)Nat Rev Mol Cell Biol 2:409-21；Simon等.(2002)Curr Opin Genet Dev 12:210-8。这两组蛋白都涉及保持同源异形框(Hox)基因表达的空间模式，其在胚胎发育早期由瞬时表达的分节基因建立。一般而言，PcG蛋白是保持“关闭状态”的转录抑制子，而trxG蛋白是保持“启动状态”的转录激活子。因为PcG和trxG蛋白的成员包含固有的组蛋白甲基转移酶(HMTase)活性，所以PcG和trxG蛋白可通过核心组蛋白的甲基化来参与细胞记忆。Beisel等.(2002)Nature419:857-62；Cao等.(2002)Science298:1039-43；Czermin等.(2002) Cell 111:185-96；Kuzmichev等.(2002)Genes Dev16:2893-905；Milne等.(2002)Mol Cell 10:1107-17；Muller等.(2002)Cell 111:197-208；Nakamura等.(2002) Mol Cell 10:1119-28。