[发明专利]脂质化多抗原表位疫苗

说明书

相关申请的交叉引用 

本申请依据2010年11月15日美国第61/413,619号专利临时申请案，其相关内容已纳入供参考。 

背景技术

利用从病原菌鉴定得的抗原表位做为标靶抗原，是一项用于研发治疗性疫苗的重要策略。以多抗原表位进行免疫，能提供较单一抗原表位疫苗更多的优点。至今，多抗原表位疫苗的发展已聚焦在DNA疫苗。然而，关于DNA疫苗，仍存在有各种安全性方面的疑虑。故有需要研发出能够克服DNA疫苗障碍的多抗原表位疫苗。 

发明内容

本发明是基于发现，含有复数个抗原表位的脂质化多肽，当投药给一个体时，能够在该个体内诱发免疫反应。 

于一方面，本发明提供一种单离的脂质化多肽，其包含一位于N-端的脂质部分及复数个抗原表位。该每一复数个抗原表位可能互不相同。于某些具体实施例，该复数个抗原表位全部皆为细胞毒性T淋巴细胞(CTL)抗原表位。 

该复数个抗原表位可全部皆源自单一种病原菌，例如得自人类乳头状瘤病毒(HPV)。在有些实例中，该复数个抗原表位包括一或多个位于E6或E7上的抗原表位。于某些实例，该复数个抗原表位包括HPV型-16及型-18的HLA-A2-限制性抗原表位，例如一或多种或所有选自表1所列的肽类。于某些具体实施例，这些复数个抗原表位为相互邻接的或不邻接的。于某些具体实施例，该多肽为脂质化A21618-D47(rlipo-A21618-D47)或脂质化A21618-SDSk(rlipo-A21618-SDSk)。 

于另一方面，本发明是关于一种包含前述脂质化多肽的组成物。 

于又一方面，本发明亦提供一种制造脂质化多肽的方法。该方法包含：提供一大肠杆菌宿主细胞，其具有一包括编码一多肽的核酸的表现载体，该多肽包含一细菌脂蛋白讯号肽区与复数个抗原表位；以及将该大肠杆菌宿主细胞进行培养，以使其表现出呈现脂质化形式的多肽，藉此制得该脂质化多肽。于某些具体实施例，该核酸是经过密码子最适化以供在大肠杆菌中表现。于某些实例，该脂蛋白讯号肽区包含Ag473的D1功能域。 

于又另一方面，本发明是关于一种于个体中引发免疫反应的方法，该方法包含将一种包含脂质化多肽的组成物投药予该个体。免疫反应可为一种由CTL-介导的免疫反应。 

本发明亦关于一种治疗人类乳头状瘤病毒(HPV)-关连疾病的方法。该方法包含将一有效量的包含本发明所述脂质化多肽的组成物投药予一有其需要的个体。 

本发明亦包括前述的脂质化多肽或组成物用于，在个体中引发免疫反应或治疗HPV-关连疾病的用途。 

“抗原”是指一种含有一或多个会刺激宿主的免疫系统，而使其产生体液性及/或细胞性抗原-专一性反应的抗原表位的分子。术语“抗原”可与“免疫原”交替使用。当“抗原”和适当的细胞接触后，其会诱发敏感状态或免疫反应，而以可论证的方式，于活体内或活体外与该受敏化的个体的抗体或免疫细胞进行反应。“抗原”能够专一地被生物体内的抗体辨识及结合。与主要组织兼容性复合体(MHC)结合的抗原，亦能够被位于T淋巴细胞(T-细胞)表面上的受体辨识及结合，而促使这些T-细胞活化。 

术语“抗原表位”用于本文意指，位于抗原上而被抗体或免疫细胞(例如，B-细胞及T-细胞)辨识的部位。术语“抗原表位”用于本文可与“抗原决定基”或“抗原决定部位”交替使用。细胞毒性T-细胞(CTL)抗原表位意指，能够活化CTL（已知亦称做Tc或杀手T细胞），并接着刺 激CTL反应(亦即，诱导异常细胞（例如，受病毒感染的细胞或肿瘤细胞）死亡)的抗原表位。CTL抗原表位（代表性地包括8-11个胺基酸残基）可与存在抗原-展现细胞表面上的特定第I类MHC分子（包括一重链与一β2微球蛋白）形成复合体。此复合体，在与CD₈T细胞（一种CTL）结合时会活化该T细胞，而因此引起CTL反应。 

术语“免疫反应”或“免疫原性反应”意指，个体的免疫系统在对于某一抗原的反应过程中所发生的任何反应。脊椎动物的免疫反应实例包括(但不限定于)制造抗体、诱发细胞-介导的免疫作用、补体活化及发展出免疫耐受性。对于后续由同一抗原的刺激所产生的免疫反应(又称之为次级免疫反应)，可能会比初级免疫反应的情况更为快速。