[发明专利]转基因植物

权利要求书

1.基因构建体，其包含与编码具有硝酸盐转运蛋白活性的多肽的编码序列可操作连接的启动子，条件是所述启动子不是花椰菜花叶病毒35S启动子。

2.根据权利要求1所述的基因构建体，其中所述启动子是组成型的、非组成型的、组织特异性的、发育调节型或诱导型/阻遏型的启动子。

3.根据权利要求1或权利要求2所述的基因构建体，其中所述启动子是香石竹蚀环病毒(CERV)启动子、豌豆质体蓝素启动子、核酮糖二磷酸羧化酶-加氧酶启动子、胭脂氨酸合成酶启动子、叶绿素a/b结合启动子、高分子量麦谷蛋白启动子、α,β-麦醇溶蛋白启动子、大麦醇溶蛋白启动子、马铃薯糖蛋白启动子、或衰老特异性启动子。

4.根据权利要求3所述的基因构建体，其中所述启动子是CERV启动子或豌豆质体蓝素启动子。

5.基因构建体，其包含与编码具有硝酸盐转运蛋白活性的多肽的编码序列可操作连接的香石竹蚀环病毒(CERV)启动子或豌豆质体蓝素启动子。

6.根据前述权利要求所述的基因构建体，其中所述启动子包含基本上如SEQ ID No.1所述的核苷酸序列，或其功能变体或功能片段。

7.根据权利要求1-5中任一项所述的基因构建体，其中所述构建体包含基本上如SEQ ID No.2所述的核苷酸序列，或其功能变体或功能片段。

8.根据前述权利要求所述的基因构建体，其中所述编码具有硝酸盐转运蛋白活性的多肽的编码序列源自拟南芥属(Arabidopsis spp.)、稻属(Oryza spp.)、杨属(Populus spp.)或烟草属(Nicotiana spp.)。

9.根据前述权利要求所述的基因构建体，其中所述编码序列源自拟南芥(Arabidopsis thaliana)、烟草(Nicotiana tabacum)、稻(Oryza sativa)或欧洲山杨(Populus tremula)，优选烟草(Nicotiana tabacum)。

10.根据前述权利要求所述的基因构建体，其中所述编码具有硝酸盐转运蛋白活性的多肽的编码序列包含基本上如SEQ ID No.3或SEQ ID No.4所述的核酸序列，或其功能变体或片段。

11.根据前述权利要求所述的基因构建体，其中所述具有硝酸盐转运蛋白活性的多肽包含基本上如SEQ ID No:5所述的氨基酸序列，或其功能变体或片段。

12.重组载体，其包含根据任一项前述权利要求所述的基因构建体。

13.根据权利要求12所述的载体，基本上如图5a和5b中所示。

14.使试验植物的叶中硝酸盐浓度减少至低于在相同条件下培养的野生型植物叶中对应的硝酸盐浓度的方法，所述方法包括改变所述试验植物中的植物代谢以实现植物叶中硝酸盐转运蛋白水平增加。

15.根据权利要求14所述的方法，其中所述方法包括用根据权利要求1-11中任一项所述的基因构建体或根据权利要求12或权利要求13所述的载体转化所述试验植物细胞。

16.产生转基因植物的方法，所述转基因植物以比在相同条件下培养的对应野生型植物更高的速率将硝酸盐转运出叶，所述方法包括以下步骤：

(i) 用根据权利要求1-11中任一项所述的基因构建体或根据权利要求12或权利要求13所述的载体转化植物细胞；和

(ii)  从所述转化的细胞再生植物。

17.用于产生转基因植物的方法，所述方法包括将编码硝酸盐转运蛋白的外源基因引入未修饰的植物，其中相对于所述未修饰的植物的叶中的硝酸盐浓度，所述外源基因编码的所述硝酸盐转运蛋白的表达降低了所述转基因植物的叶中的硝酸盐浓度。

18.转基因植物，其包含根据权利要求1-11中任一项所述的基因构建体或根据权利要求12或权利要求13所述的载体。

19.转基因植物，其包含编码硝酸盐转运蛋白的外源基因，其中与未修饰的植物叶中的硝酸盐浓度相比，所述转基因植物叶中的硝酸盐浓度降低。