[发明专利]使用膨胀床色谱从植物中捕获病毒样颗粒的方法

权利要求书

1.用于从混合物中捕获目的病毒样颗粒的方法，包括使用吸附剂膨胀床；合适地，其中所述方法包括步骤：(a)提供吸附剂膨胀床；(b)将混合物与吸附剂相接触，使得混合物中的病毒样颗粒结合于吸附剂；(c)可选地，洗涤吸附剂；以及(d)可选地，从吸附剂中洗脱病毒样颗粒。

2.根据权利要求1的方法，其中病毒样颗粒包含流感病毒蛋白质。

3.根据权利要求1或权利要求2的方法，其中病毒样颗粒包含血凝素；合适地，包含选自H1、H2、H3、H4、H5、H6、H7、H8、H9、H10、H11、H12、H13、H14、H15或H16的血凝素亚型，或其中两种或更多种的组合。

4.根据任何前述权利要求的方法，其中混合物包含破裂的植物细胞；合适地，其中植物为用在植物中瞬时表达蛋白质的核酸分子浸润的烟草植物，所述蛋白质存在于病毒样颗粒中；更合适地，其中混合物为植物的地上部分，或来源于植物的地上部分。

5.根据任何前述权利要求的方法，其中珠子包含选自以下的材料，或由所述材料构成，或基本上由所述材料构成：塑料、甲基丙烯酸酯、阴离子交换剂、二乙氨基乙基、阳离子交换剂、多糖、硅石、聚（苯乙烯）苯、聚丙烯酰胺、陶瓷及其衍生物或者其中两种或更多种的组合；合适地，其中珠子包含多糖，由多糖构成，或基本上由多糖构成，所述多糖选自：纤维素、琼脂糖和葡聚糖及其衍生物或其中两种或更多种的组合。

6.根据权利要求5的方法，其中珠子包含惰性内核，惰性内核材料包含选自以下物质的材料，或由这些构成，或基本上由这些构成，所述物质为：石英，硅石，Nd-Fe-B系合金，不锈钢，锆氧化物，氧化锆，金属硅酸盐，金属硼硅酸盐，陶瓷包括二硼化钛、碳化钛、二硼化锆，碳化锆，碳化钨，碳化硅，氮化铝、氮化硅，氮化钛，氧化钇，硅的金属粉末，和二硅化钼；金属氧化物和硫化物，包括镁，铝，钛，钒，铬，锆，铪，锰，铁，钴，镍，铜和银的氧化物；非金属氧化物；金属盐，包括硫酸钡；金属元素，包括钨，锆，钛，铪，钒，铬，锰，铁，钴，镍，铟，铜，银，金，钯，铂，钌，锇，铑和铱，以及金属元素的合金，如所述金属元素之间形成的合金，及其衍生物，或者其中两种或更多种的组合。

7.根据权利要求5-6中任何一项的方法，其中结合于目的颗粒的珠子大小为大约25μm-100μm；合适地，为大约50μm。

8.根据任何前述权利要求的方法，其中所述方法包括预捕获步骤，其包括使用第一吸附剂膨胀床；合适地，其中珠子大小为大约125μm-250μm；更合适地，为大约150μm。

9.根据任何前述权利要求的方法，其中吸附剂包含配体，由配体构成，或基本上由配体构成；合适地，其中配体包含选自以下的配体，由所述配体构成，或基本上由所述配体构成，所述配体为：(i)苄胺或其衍生物；(ii)烷基胺或其衍生物；(iii)烯基胺或其衍生物；(iv)炔基胺或其衍生物；(v)烷氧基胺或其衍生物；以及(vi)单环或双环芳族或杂芳族部分的胺类，或其衍生物，或者其中两种或更多种的组合；或者其中配体包含阴离子交换树脂，由阴离子交换树脂构成，或基本上由阴离子交换树脂构成；合适地，其中阴离子交换树脂包含二乙氨基乙基纤维素基的离子交换树脂，由二乙氨基乙基纤维素基的离子交换树脂构成，或基本上由二乙氨基乙基纤维素基的离子交换树脂构成，或者包含二乙氨基乙基纤维素葡聚糖基的离子交换树脂，由二乙氨基乙基纤维素葡聚糖基的离子交换树脂构成，或基本上由二乙氨基乙基纤维素葡聚糖基的离子交换树脂构成。

10.根据任何前述权利要求的方法，其中混合物在接触吸附剂之前的电导率为大约1mS/cm-10mS/cm;和/或混合物在接触吸附剂之前的pH为大约pH6.0-pH8.0。

11.根据任何前述权利要求的方法，其中膨胀床的膨胀度范围为大约1-5；并且混合物流穿膨胀床的线性流速范围为大约1cm/min-15cm/min。