[发明专利]抗LIV-1的人源化抗体及其在治疗癌症中的用途

说明书

交叉申请案的交互参照

本申请是非临时专利申请，并主张US61/420,291(2010年12月6日提出申请)及US61/446,990(2011年2月25日提出申请)的优先权，每个优先权均以参照方式并入本申请以符合所有目的。

背景技术

LIV-1是锌转运蛋白类的LZT(LIV-1-ZIP锌转运蛋白)亚家族的一员。Taylor et al.,Biochim.Biophys.Acta1611:16-30(2003)。LIV-1蛋白的计算机分析显示了一个潜在的金属蛋白酶基序（motif），该基序符合锌金属蛋白酶的酶催化性（catalytic）锌结合位点基序的一致序列。LIV-1mRNA主要表答于乳房、前列腺、脑下垂体及脑组织。

已知该LIV-1蛋白亦与某些癌状况有关，例如乳癌和前列腺癌。检测到LIV-1与雌激素受体阳性乳癌(McClelland et al.,Br.J.Cancer77:1653-1656(1998))及这些癌转移扩散至区域性淋巴结有关。Manninget al.,Eur.J.Cancer30A:675-678(1994)。

发明内容

本发明提供一种人源化抗体，其包含成熟重链可变区及成熟轻链可变区，所述成熟重链可变区具有与SEQ ID NO:53至少90%一致性的氨基酸序列，且其中位点H27被L占据、位点H29被I占据、位点H30被E占据、位点H94被V占据，所述成熟轻链可变区具有与SEQ ID NO:60至少90%的一致性的氨基酸序列，且其中位点L36被Y占据、位点L46被P占据。可选地，所述人源化抗体包含SEQ ID NO:53的三个CDRs及SEQ ID NO:60的三个CDRs。所述CDRs显示于图16中。可选地，位点H76被N占据。可选地，所述人源化抗体包含成熟重链可变区及成熟轻链可变区，其中所述成熟重链可变区具有与SEQ ID NO:53至少95%一致性的氨基酸序列，且所述成熟轻链可变区具有与SEQ ID NO:60至少95%一致性的氨基酸序列。可选地，所述成熟重链可变区与重链恒定区融合，且所述成熟轻链可变区与轻链恒定区融合。可选地，所述重链恒定区是天然人恒定区的突变形式，相比于所述天然人恒定区，所述天然人恒定区的突变形式与Fcγ受体的结合减少。可选地，所述重链恒定区是IgG1同种型。可选地，所述重链恒定区具有包含SEQ ID NO:44的氨基酸序列，且所述轻链恒定区具有包含SEQ ID NO:42的氨基酸序列。可选地，所述重链恒定区具有包含SEQ ID NO:46(S239C)的氨基酸序列，且所述轻链恒定区具有包含SEQ ID NO:42的氨基酸序列。在一些这样的人源化抗体中，分别源自SEQ ID NO:52和SEQ ID NO:60的成熟重链可变区和成熟轻链可变区的CDRs的任何差异位于位点H60至H65。在一些这样的人源化抗体中，所述成熟重链可变区具有被指定为SEQ ID NO:52或53的氨基酸序列，且所述成熟轻链可变区具有被指定为SEQ ID NO:59或60的氨基酸序列。在一些这样的人源化抗体中，所述成熟重链可变区具有被指定为SEQ ID NO:53的氨基酸序列，且所述成熟轻链可变区具有被指定为SEQ ID NO:60的氨基酸序列。一些这样的人源化抗体与细胞毒性剂或细胞抑制剂共轭。一些这样的人源化抗体与人或食蟹猴的LIV-1的结合常数为0.5至2×10⁹M^-1。

本发明还提供一种人源化抗体，其包含成熟重链可变区及成熟轻链可变区，所述成熟重链可变区包含SEQ ID NO:52的三个Kabat CDRs，其中位点H27被L占据、位点H29被I占据、位点H30被E占据、位点H76被N占据、位点H94被V占据，所述成熟轻链可变区包含SEQ ID NO:60的三个Kabat CDRs，其中位点L36被Y占据、位点L46被P占据。本发明还提供一种核酸，其编码任一种上述定义的人源化抗体的成熟重链可变区和/或成熟轻链可变区。

本发明还提供一种治疗患癌症或有患癌风险的病患的方法，包括对所述病患给予任一种上述定义的人源化抗体的有效给药方案。所述癌症是乳癌、前列腺癌、宫颈癌或黑色素瘤。

本发明进一步提供一种药物组合物，其包含以上定义的人源化抗体。

本发明进一步提供治疗患有黑色素瘤（所述黑色素瘤表达LIV-1蛋白）病患的方法，即对所述病患给予LIV-1特异性抗体或LIV-1抗体药物共轭物，而给药剂量对于抑制黑色素瘤癌细胞的生长是足够的。