[发明专利]同等型富集的抗体制备物及其获得方法

权利要求书

1.一种用于生成抗体制备物的方法，该方法包括以下步骤：

a)将包含抗体的不同同等型的缓冲溶液施加到阳离子交换层析材料，

b)将具有第一电导率的第一溶液施加到所述阳离子交换层析材料，由此所述抗体同等型保持吸附于所述阳离子交换层析材料，

c)将具有第二电导率的第二溶液施加到所述阳离子交换层析材料，并由此获得抗体制备物，

其中所述第二溶液的电导率超出所述第一溶液的电导率不超过50%。

2.一种用于生成抗体制备物的方法，该方法包括以下步骤：

a)培养包含编码抗体的核酸的哺乳动物细胞，并从所述细胞或培养液回收所述抗体，

b)通过至少一个柱层析步骤纯化所述抗体，其中所述至少一个层析步骤包括以下步骤：

i)将包含所述抗体的不同同等型的缓冲溶液施加到阳离子交换层析材料，

ii)将具有第一电导率的第一溶液施加到所述阳离子交换层析材料，由此所述抗体同等型保持与所述阳离子交换层析材料结合，并

iii)将具有第二电导率的第二溶液施加到所述阳离子交换层析材料，并由此生成抗体制备物，

其中所述第二溶液的电导率超出所述第一溶液的电导率不超过50%。

3.依照前述权利要求中任一项的方法，其特征在于所述第二溶液的电导率超出所述第一溶液的电导率不超过15%。

4.依照权利要求3的方法，其特征在于所述第二溶液的电导率超出所述第一溶液的电导率不超过10%。

5.依照前述权利要求中任一项的方法，其特征在于所述阳离子交换层析材料具有可膨胀基质。

6.依照权利要求5的方法，其特征在于所述可膨胀基质是琼脂糖。

7.依照前述权利要求中任一项的方法，其特征在于所述阳离子交换层析材料是强阳离子交换层析材料。

8.依照权利要求7的方法，其特征在于所述强阳离子交换层析材料是磺丙基阳离子交换层析材料。

9.依照前述权利要求中任一项的方法，其特征在于在单一步骤中或在线性梯度中将所述第一溶液改变成所述第二溶液。

10.依照权利要求9的方法，其特征在于所述单一步骤是从100vol%所述第一溶液至100vol%所述第二溶液的变化。

11.依照前述权利要求中任一项的方法，其特征在于所述第一溶液包含20mM柠檬酸钠和10mM氯化钠或25mM TRIS和10mM氯化钠。

12.依照前述权利要求中任一项的方法，其特征在于所述第二溶液包含20mM柠檬酸钠和5mM氯化钠或25mM TRIS和70mM氯化钠。

13.依照前述权利要求中任一项的方法，其特征在于所述抗体是抗HER2抗体。

14.依照权利要求13的方法，其特征在于所述抗HER2抗体是抗HER2抗体曲妥珠单抗(trastuzumab)或抗HER2抗体培妥珠单抗(Pertuzumab)。

15.依照前述权利要求中任一项的方法，其特征在于所述第一溶液的电导率是4mS/cm至5mS/cm的。

16.通过依照权利要求1至15中任一项的方法获得的抗HER2抗体。