[发明专利]诱导针对EGFRvIII的免疫应答的方法和组合物

权利要求书

1.一种在受试者中诱导针对EGFRvIII的T细胞应答的方法，所述方法包括：

在所述受试者中在选择用于在所述受试者中诱导所述T细胞应答的条件下重组表达至少一种免疫原性多肽，所述免疫原性多肽的氨基酸序列包含多个EGFRvIII多肽序列，所述多个EGFRvIII多肽序列的序列各自包含EEKKGNYV(SEQ ID NO:3)。

2.根据权利要求1所述的方法，其中所述多个EGFRvIII多肽序列包含选自由以下组成的组的一个或多个氨基酸序列：LEEKKGNYV(SEQ ID NO:4)、LEEKKGNYVVTDH(SEQ ID NO:2)，和PASRALEEKKGNYVVTDHGSC(SEQ ID NO:5)。

3.根据权利要求2所述的方法，其中所述多个EGFRvIII多肽序列包含至少3个拷贝的PASRALEEKKGNYVVTDHGSC(SEQ ID NO:5)。

4.根据权利要求2所述的方法，其中所述多个EGFRvIII多肽序列包含至少5个拷贝的PASRALEEKKGNYVVTDHGSC(SEQ ID NO:5)。

5.根据权利要求1至4中的任一项所述的方法，其中每个EGFRvIII多肽序列侧接被构造成被所述蛋白酶体裂解的序列。

6.根据权利要求5所述的方法，其中每个EGFRvIII多肽序列侧接选自由以下组成的组的序列：ASKVL↓ADGSVK、ASKVA↓GDGSIK、LSKVL↓ADGSVK、LAKSL↓ADLAVK、ASVVA↓GIGSIA、GVEKI↓NAANKG，和DGSKKA↓GDGNKK(SEQ ID NOS:6-12)，其中每个箭头均代表EGFRvIII多肽序列。

7.根据权利要求1至6中的任一项所述的方法，其中通过施用单核细胞增生李斯特菌细菌而使得所述免疫原性多肽在所述受试者中表达，所述单核细胞增生李斯特菌细菌包含编码整合到所述细菌的基因组中的所述免疫原性多肽的核酸序列，所述核酸序列可操作地连接至使得所述免疫原性多肽在所述受试者中表达的控制序列。

8.根据权利要求7所述的方法，其中所述细菌为actA缺失突变体或actA插入突变体、inlB缺失突变体或inlB插入突变体或包含actA缺失或actA插入与inlB缺失或inlB插入二者的ΔactA/ΔinlB突变体。

9.根据权利要求8所述的方法，其中所述核酸序列已被整合到所述细菌的毒力基因中，并且所述核酸序列的整合破坏所述毒力基因的表达或破坏所述毒力基因的编码序列。

10.根据权利要求9所述的方法，其中所述毒力基因为actA或inlB。

11.根据权利要求1-10中的任一项所述的方法，其中所述细菌为减毒单核细胞增生李斯特菌。

12.根据权利要求11所述的方法，其中所述细菌为LmΔactA/ΔinlB。

13.根据权利要求12所述的方法，其中所述细菌进一步包含减弱所述细菌修复核酸的能力的基因突变。

14.根据权利要求13所述的方法，其中所述基因突变为选自phrB、uvrA、uvrB、uvrC、uvrD和recA的一个或多个基因中的突变。

15.根据权利要求11所述的方法，其中所述细菌为单核细胞增生李斯特菌prfA突变体，其基因组编码具有组成性活性的prfA蛋白。

16.根据权利要求11所述的方法，其中所述细菌为被杀死但具有代谢活性的单核细胞增生李斯特菌。

17.根据权利要求16所述的方法，其中所述细菌为单核细胞增生李斯特菌prfA突变体，其基因组编码具有组成性活性的prfA蛋白。

18.根据权利要求7所述的方法，其中所述核酸序列经密码子优化以便被单核细胞增生李斯特菌表达。

19.根据权利要求7-18中的任一项所述的方法，其中选择用于在所述受试者中诱导所述T细胞应答的所述条件包括通过选自由以下组成的组的一种或多种施用途径给所述受试者施用所述单核细胞增生李斯特菌：经口施用、肌内施用、静脉内施用、皮内施用，和皮下施用。