[发明专利]非拮抗性EGFR结合分子及其免疫偶联物

说明书

技术领域

本发明整体涉及结合到EGFR的抗体、其抗原结合片段、多肽和免疫偶联物。具体地讲，本发明涉及作为免疫偶联物不会抑制EGFR信号传导但对EGFR过表达肿瘤细胞具有高细胞毒性的抗EGFR抗体及其片段。本发明还涉及将此类EGFR结合分子用于诊断和治疗疾病诸如恶性肿瘤的方法。

发明背景

表皮生长因子受体（EGFR或ErbB1或HER1）是包括HER2(ErbB2)、HER3(ErbB3)和HER4(ErbB4)的受体酪氨酸激酶(RTK)的人表皮生长因子受体(HER)家族的成员。这些RTK共有由以下结构域组成的同源结构：配体结合胞外结构域(ECD)、单跨跨膜结构域以及包含催化激酶结构域和C端尾的胞内结构域。HER激酶信号传导通过胞外配体的结合而引发，这种结合诱导受体二聚化和胞内区域的转磷酸作用。这些事件生成初始信号，导致对细胞增殖和存活至关重要的许多下游信号传导途径的激活。

EGFR在许多上皮细胞起源的恶性肿瘤类型中过表达，诸如头颈、结直肠、肺、卵巢、肾、胰腺、皮肤和其它实体瘤。EGFR介导的信号传导途径在肿瘤生长和转移的进展中发挥着重要作用，从而使得EGFR成为肿瘤疗法的良好靶标(Baselga,Oncologist,7:2-8(2002),Yarden和Sliwkowski,Nat Rev Mol Cell Biol,2:127-137(2001))。目前，有四种EGFR靶向剂已得到批准用于治疗结直肠癌、胰腺癌、头颈癌和非小细胞肺癌，包括两种小分子酪氨酸激酶抑制剂(TKI)（埃罗替尼(Tarceva)和吉非替尼(Iressa))以及两种裸单克隆抗体(西妥昔单抗(Erbitux)和帕尼单抗(Vectibix))。这些抗EGFR剂强烈抑制EGFR激活和下游信号传导。TKI与ATP竞争对EGFR胞内激酶结构域(Baselga和Arteaga,J Clin Oncol,23:2445-2459(20005))的结合，而两种单克隆抗体则与EGFR配体竞争对受体的结合(Gill等,J Biol Chem,259:7755-7760(1984),Goldstein等,Clin Cancer Res,1:1311-1318(1995),Prewett等,Clin Cancer Res,4:2957-2966(1998))。

抗EGFR疗法并不完美。抑制EGFR信号传导只在某些肿瘤类型中有效。例如，抗EGFR抗体的疗效在具有KRAS、BRAF、PIK3CA和PTEN突变的结直肠癌患者中显著降低(De Roock等,Lancet Oncol,11:753-762(2010),Bardelli和Sienna,J Clin Oncol,28:1254-1261(2010))。另外，小分子EGFR抑制剂的活性也受限于具有激活EGFR突变的NSCLC患者(Linardou等Nat Rev Clin Oncol,6:352-366(2009),Paz-Ares等,J Cell Mol Med,14:51-69(2009),Mok等,Discov Med,8:227-231(2009))。EGFR疗法还会导致皮肤毒性。EGFR在皮肤正常基底上皮细胞中的表达在上皮的正常发育和生理机能中发挥着关键作用，而抑制EGFR信号传导会导致多种皮肤毒性，包括痤疮样皮疹、皮肤干燥、瘙痒症、甲沟炎、毛发异常、黏膜炎以及睫毛或面部毛发生长加速(综述于Li和Perez-Soler,Targ Oncol4:107-119(2009))。虽然极少危及生命，但是皮肤毒性会导致降低患者生活质量的严重生理和心理不适。另外，在大约10%的患者中，皮肤毒性的严重程度使得需要中断或停止治疗，这会影响EGFR抑制剂的临床结果。

因此，需要改善的抗EGFR疗法，其对正常组织无害但仍能非常有效地治疗EGFR过表达的恶性肿瘤。为了解决这一特定需求，本发明着重于独特的EGFR抗体，它们作为免疫偶联物不会抑制EGFR信号传导，但对EGFR表达肿瘤细胞具有高细胞毒性。

发明概述

本发明整体涉及结合到EGFR的抗体、其抗原结合片段、多肽和免疫偶联物。具体地讲，本发明涉及作为免疫偶联物不会抑制EGFR信号传导但对EGFR过表达肿瘤细胞具有高细胞毒性的抗EGFR抗体及其片段。本发明还涉及将此类EGFR结合分子用于诊断和治疗疾病诸如恶性肿瘤的方法。