[发明专利]通过添加由NKT细胞识别的表位来调整抗原免疫原性

说明书

技术领域

本发明涉及具有补充和激活NKT细胞的能力的肽或多肽以及其治疗具有细胞内有机体或肿瘤的感染和通过接种策略预防疾病的用途。

背景技术

由细胞内病原体所致的慢性传染病难以治疗，因为感染细胞降低通常允许免疫系统特异性识别所述感染细胞的许多分子的表面表达。实例是分枝杆菌感染，其中感染细胞抑制主要组织相容性(MHC)复合体的分子的表达，从而阻止通过CD8谱系的T淋巴细胞识别(经由MHCI类识别)和通过CD4谱系的淋巴细胞识别(经由II类MHC识别)。实际上，许多细菌和病毒具有逃避感染细胞识别的复杂方法。

在一定程度上，相同机理允许肿瘤逃避检测。此类肿瘤中的一些至少在炎性状况下表达MHCII类决定簇。最近的实验已经表明，即便当通过例如接种增加了呈现MHC I类的肿瘤衍生肽的CD8识别，对肿瘤生长的总效应仍有限。

在具有细胞内病原体的慢性感染中和在肿瘤中，急切需要制定新的方法，通过该方法，感染细胞或肿瘤细胞分别将被识别和消除。

用于传染病的接种是现行实践。然而，在大量的状况中，因特异性抗体对病原体的优先诱导和没有或极少诱出将识别感染细胞的免疫细胞，接种的功效很有限。因此，通过接种预防病毒和细菌疾病通常功效有限。在至少在某些世界区域内若干疫苗对病毒疾病、例如流感病毒、轮状病毒或甚至脊髓灰质炎病毒的功效中可找到实例。在一些情况下，考虑用于接种的抗原是弱免疫原，并且由于MHC决定簇的巨大差异，从一个受治疗者到另一个受治疗者观察到功效的显著变化。

用于变应性疾病的接种也受到限制，所述限制与变应原的弱免疫原性有关，或者与缺乏风险控制有关，所述风险与向受治疗者施用变应原很容易引起变应性症状有关。

在针对传染剂和针对变应原的接种中，都需要更有效和更安全的方法。

自然杀伤T(NKT)细胞构成识别由非经典MHC络合分子CD1d呈现的抗原的非常规T淋巴细胞的不同谱系。现在描述NKT细胞的两个亚型。1型NKT细胞，也称为不变NKT细胞(iNKT)，是最丰富的。它们的特征在于，存在由不变α链（小鼠中的Vα14和人中的Vα24）构成的α-β T细胞受体(TCR)。该α链与变量相关，但限制β链的数量。2型NKT细胞具有α-β TCR，但携带多态α链。然而，显而易见的是存在NKT细胞其它亚型，其表型仍未完全定义，但其特征为由在CD1d分子的背景下存在的糖脂激活。

NKT细胞一般表达自然杀伤(NK)细胞受体（包括NKG2D和NK1.1）的组合。NKT细胞是先天免疫系统的一部分，其可以区别于适应性免疫系统，实际上它们在得到完全效应子能力之前不需要扩张。NKT细胞的激活导致各种作用。这种细胞释放预形成介体，包括帮助B细胞产生抗体的一大列细胞因子(包括IL-4，IFN-γ，IL-21和IFN- α)，并且有人提出细胞因子的释放也可影响CD4+ T细胞(Burrows等人，Nature Immunology 2009，10:669-671)。在本发明中，提高B细胞激活和主要组织相容性(MHC) II类限制性CD4+ T细胞激活将是有益的。

用于NKT细胞的识别单元（CD1d分子）具有与MHC I类分子极其类似的结构，包括β-2微球蛋白的存在。其特征为毗连两个α链的很深裂隙并且含有接收脂质链的高度疏水的残基。该裂隙在两个末端开放，允许容纳较长链。用于CD1d的规范配位体是合成的α半乳糖酰基鞘氨醇(α GalCer)。然而，已经描述了许多自然替代性配位体，包括糖脂和磷脂，该自然脂质硫脂发现于髓鞘质、微生物磷酸肌醇甘露糖苷和α半乳糖醛酸神经酰胺中。目前的共识(参见综述，诸如Matsuda等人，Current Opinion in Immunology 2008, 20:358-368和Godfrey等人, Nature reviews Immunology 2010, 11:197-206)在于，CD1d仅结合含脂质链的配位体，或通常由被嵌入CD1d中的脂质尾部和从CD1d中伸出的糖类残基首基构成的常见结构。

不认为肽能够通过CD1d的呈现活化NKT细胞。然而，有人提出，含庞大氨基酸残基的长疏水肽可以结合至CD1d (Castano等人，Science 1995, 269:223-226)。使用表达具有未定义的生理相关性的随机序列肽的噬菌体呈现文库进行的观察，允许确立理论共有基序(Castano等人，Science 1995, 269: 223-226并且参见下文)。