[发明专利]免疫刺激性寡核苷酸

说明书

相关申请的交叉引用

本申请要求2010年11月16日提交的美国申请61/414194的优先权。该在先申请的内容通过引用全文并入本文。

背景

免疫系统的刺激包括先天免疫和获得性免疫之一或者两者的刺激，它是一种复杂的现象，可能给宿主带来保护性的或者不利的生理结果。近年来人们对先天免疫的机制日益感兴趣，因为先天免疫被认为启动和支持了获得性免疫。最近发现的一个高度保守的模式识别受体蛋白家族，即据信作为病原相关分子模式(PAMPS)参与先天免疫的Toll样受体(TLRs)更部分地促进了这一兴趣。因此对于可以用来调节先天免疫的组合物和方法有极大的兴趣，因为它们会影响到涉及自身免疫性疾病、炎症、过敏、哮喘、移植排斥、移植物抗宿主病(GVHD)、感染、癌症和免疫缺陷等状况的治疗方法。

最近有一些报告描述了某些核酸酸分子(包括CpG核酸，富含GU的单链RNA和双链RNA)的免疫刺激效应。有名的是据报道，Toll样受体9(TLR9)能够识别胞嘧啶未被甲基化的细菌DNA和含有CpG基序的寡核苷酸。参见例如，Hemmi H et al.(2000)Nature408:740-5;Bauer S.et al.(2001)Proc Natl Acad Sci USA98:9237-42。在美国专利例如6,194,388，6,207,646，6,239,116和6,218,371以及已公布的国际专利申请，比如WO98/37919、WO98/40100、WO98/52581和WO99/56755中描述了含有CpG的寡核苷酸对免疫调节的影响。

然而，希望有更多的具有免疫刺激作用的特异核酸序列以便在各种情境提供免疫刺激。因此，需要的是涵盖这样的新免疫刺激性核酸的组合物和相关方法。

概述

发明人发现可以通过实践本文公开的发明来克服上面提到的问题和局限性。特别是发明人发现有可能提供包含免疫刺激性分离的核酸分子和任选的药学上可接受的赋形剂的组合物以及相关的方法，所述核酸分子含有序列：

5'-TCGTCGAACGTTCGCGAACGTTCG-3'[SEQ ID NO:l];

其中至少一个C未被甲基化。

免疫刺激性核酸可以包含一个或多个稳定化修饰，例如，3'OH或5'OH基团的修饰、核苷酸碱基的修饰、糖组分的修饰和/或磷酸基团的修饰，稳定化修饰可以包括使用硫代磷酸骨架。在一些实施方案中，免疫刺激性核酸不包含稳定化修饰。

组合物还可以包含抗原，例如，B细胞抗原或T细胞抗原。T细胞抗原可以包括T辅助细胞抗原。示范性的B细胞抗原包括一或多个蛋白质、肽、小分子和碳水化合物。

组合物还可以包含(例如，共价键或非共价地)偶联在免疫刺激性核酸上的载体(例如，蛋白载体或合成的纳米载体)。纳米载体可以另外(例如，共价键或非共价地)偶联抗原。组合物还可以包含其他的不与免疫刺激性分离核酸偶联的合成纳米载体。其他合成纳米载体可以例如偶联抗原(例如，T辅助细胞抗原)。

本发明还提供了包含SEQ ID NO:1序列的核酸。

本发明还提供了方法，所述方法包括将本文公开的组合物或核酸给予受试者。

本发明还提供了诱导受试者中IL-6产生的方法，所述方法包括将文中公开的组合物或核酸以能够在受试者中诱导IL-6的有效量给予受试者。

本发明还提供了诱导受试者中α-干扰素的方法，所述方法包括将文中公开的组合物或核酸以能够在受试者中诱导α-干扰素的有效量给予受试者。

本发明还提供了诱导受试者中IP-10的方法，所述方法包括将文中公开的组合物或核酸以能够在受试者中诱导IP-10的有效量给予受试者。

本发明还提供了疫苗，所述疫苗包含本文公开的组合物和核酸。

本发明还提供了方法，所述方法包括将本文公开的含有抗原的组合物以能够诱导受试者中抗所述抗原的抗体反应的有效量给予受试者。本发明还提供了本文公开的含有抗原的组合物在受试者中诱导抗所述抗原的抗体反应的用途。本发明还提供了本文公开的含有抗原的组合物，其用于在受试者中诱导抗抗原的抗体反应。

本发明还提供免疫刺激性组合物和用于诱导受试者中抗抗原的抗体反应的组合物，它们包含本文公开的组合物和核酸。

在详细描述本发明之前，应当理解，本发明并不限于特别例举的材料或流程参数，因为它们当然可以变化。也应当理解，本文中使用的术语只是为了描述发明的特定实施方案的目的，不是意图限制用替代的术语来描述本发明。