[发明专利]乌苏里蝮蛇毒FLE基因、其编码蛋白及其真核表达产物的制备方法

权利要求书

1.乌苏里蝮蛇毒FLE基因，其特征在于乌苏里蝮蛇毒FLE基因是下述核苷酸序列之一：

1)序列表中SEQ ID NO：1的DNA序列；

2)编码序列表中SEQ ID NO：2的DNA序列。

2.权利要求1所述乌苏里蝮蛇毒FLE基因的编码蛋白，其特征在于乌苏里蝮蛇毒FLE基因的编码蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO：2所示。

3.权利要求1所述乌苏里蝮蛇毒FLE基因真核表达产物的制备方法，其特征在于乌苏里蝮蛇毒FLE基因真核表达产物的制备方法，按以下步骤进行：

一、构建乌苏里蝮蛇毒FLE基因的真核表达载体ppFASTBACHTa-FLE重组质粒；二、ppFASTBACHTa-FLE重组质粒的提取及纯化；三、重组质粒注射小鼠：取20μg纯化的ppFASTBACHTa-FLE重组质粒，用生理盐水稀释到小鼠体重的1/10，小鼠经尾静脉注射稀释的ppFASTBACHTa-FLE重组质粒，在5s内注射完毕，8h后，将小鼠经颈椎脱臼处死，取出肝脏组织，放入生理盐水中；四、真核表达产物的制备：采用pH为7.2的磷酸盐缓冲液清洗小鼠肝脏组织3～5次，然后按照200mg组织/ml的比例向肝脏组织中加入单去污剂裂解液，匀浆，然后于4℃、12000r/min离心10min，取上清液，采用亲和层析法进行蛋白纯化，即完成乌苏里蝮蛇毒FLE基因真核表达产物的制备。