[发明专利]制备硫酸依替米星的方法

说明书

技术领域

本发明属于制药工程领域，涉及一种制备硫酸依替米星的方法，尤其涉及采用大孔吸附树脂分离、纯化并制备高纯度硫酸依替米星的方法。

背景技术

硫酸依替米星(Etimicin Sulfate，又名抗生素89-07，爱大霉素)是一种高效、低毒、抗耐药菌的新一代半合成氨基糖苷类抗生素，其化学名为1-N-乙基庆大霉素C1a硫酸盐。其具体结构及性质等信息详见中国药典。

在专利申请CN 1100467A中硫酸依替米星发明人赵敏等报道了该新药的化学结构、制备方法、药物剂型及药理学研究成果。但其制备方法较粗糙，虽然使用大孔吸附树脂分离，但溶剂法洗脱成本高，纯度、收率低，而且污染环境。除此之外，国内外对于此物质的分离纯化方法鲜有报道。

而有关于氨基糖苷类物质分离纯化方法的报道，主要是专利申请CN1974585A用膜分离或CN 1974586A用大孔吸附树脂富集并初分离的方法。其缺点是分离纯化后纯度较低(低于95％)且不易大规模生产。另外与其结构类似的奈替米星及西索米星等氨基糖苷类抗生素，文献报道是采用大孔弱酸性阳离子交换树脂来分离，并用氨水等洗脱剂洗脱。此方法存在树脂再生繁琐和氨水挥发及生产上不易控制等问题。

本发明使用的粗品为冻干粗品粉末颗粒，由合成反应后的水解液浓缩冻干制成。其可以由专利申请CN1100467A和专利申请CN101928311A的方法制备获得。其TLC及HPLC色谱检测方法及质量控制标准参考中国药典2005版或2010版方法。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是提供一种简单的方法制备高纯度硫酸依替米星，该方法不仅能够很好的去除色素和水溶性杂质，且适合大规模的工业生产，具有很好的商业价值。本发明方法能将硫酸依替米星最终纯度提高到94％以上。

因此，本发明的目的是提供一种制备硫酸依替米星的方法，所述方法包括以下步骤：

1)将浓度为50-100mg/ml的含有依替米星的粗溶液的pH调节至9.0-12.0，得到母液；

2)上述母液上大孔吸附树脂柱，用水洗脱，然后用pH 2.5-3.0的稀硫酸溶液洗脱，再用pH 1.5-2.0的稀硫酸溶液分步洗脱收集，最后浓缩为含50-100mg/ml硫酸依替米星的溶液，得到初分离溶液；

3)将上述初分离溶液的pH调节至10.0-11.5，然后上反相吸附树脂柱，用水洗脱，然后用pH 1.5-2.0的稀硫酸溶液分步洗脱收集，最后浓缩为含100-200mg/ml硫酸依替米星的溶液，浓缩后冻干即得精制品。

根据本发明一个优选的实施方式，步骤1)中，形成依替米星溶液的硫酸依替米星粗品可以为冻干颗粒形式或液体形式，如果硫酸依替米星为冻干颗粒形式，则将冻干的粗品粉末颗粒溶解至50-100mg/ml浓度的液体，并用浓氢氧化钠溶液调pH至9.0-12.0；如果硫酸依替米星为液体形式，则直接将需要分离的液体浓缩至上述浓度，调pH至9.0-12.0。

根据本发明一个优选的实施方式，步骤2)中所述大孔吸附树脂柱的参数如下：含水量为65-85％，湿真密度(20℃)为1.0-1.2g/ml，湿视密度为0.65-0.85g/ml，粒度范围0.315-1.25mm，比表面积为400m²/g-900m²/g。优选的树脂为XAD-4、XAD-18、HZ-803、HZ-806或AB-8，其中更优选的树脂是HZ-806和XAD-18树脂。

根据本发明一个优选的实施方式，步骤3)中所述反相吸附树脂柱参数如下：粒径为50-100μm，孔径为介质为聚苯乙烯-二乙烯苯。其中，所述的孔径较佳的为所述优选粒径为70μm。所述的大孔反相吸附树脂更佳的为苏州纳微生物科技有限公司生产的大孔反相吸附脂，型号为NM PS100，其粒径为：50-100μm，孔径为介质为聚苯乙烯-二乙烯苯。

根据本发明一个优选的实施方式，步骤2)和3)中所述浓缩步骤采用纳滤膜和旋蒸仪进行。

根据本发明一个优选的实施方式，步骤2)和3)中所述水可以为蒸馏水、去离子水或市售纯净水。

根据本发明一个优选的实施方式，步骤2)和3)中所使用的pH 2.5-3.0的稀硫酸溶液的体积为10-20个柱体积(CV)。

根据本发明一个优选的实施方式，步骤2)和3)中所使用的水的体积为2-3CV。水洗脱可以去除盐及水溶性杂质。