[发明专利]拟南芥DNA糖苷酶AtOGG1在提高种子寿命和萌发活力中的应用有效
申请号: | 201210003095.3 | 申请日: | 2012-01-06 |
公开(公告)号: | CN102533815A | 公开(公告)日: | 2012-07-04 |
发明(设计)人: | 黄上志;陈虎辉 | 申请(专利权)人: | 中山大学 |
主分类号: | C12N15/55 | 分类号: | C12N15/55;C12N15/82;C12N15/66;A01H5/10 |
代理公司: | 广州粤高专利商标代理有限公司 44102 | 代理人: | 陈卫 |
地址: | 510275 广东*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 拟南芥 dna 糖苷酶 atogg1 提高 种子 寿命 萌发 活力 中的 应用 | ||
1.拟南芥DNA糖苷酶AtOGG1在提高种子寿命和萌发活力中的应用。
2.根据权利要求1所述的应用,其特征在于拟南芥DNA糖苷酶AtOGG1提高拟南芥种子在胁迫环境下的萌发活力。
3.根据权利要求2所述的应用,其特征在于所述胁迫环境为人工老化环境。
4.根据权利要求3所述的应用,其特征在于所述人工老化环境为甲基紫精、盐、甘露醇和/或最高52℃的高温胁迫环境。
5.根据权利要求1所述的应用,其特征在于是通过制备含有拟南芥DNA糖苷酶AtOGG1的转基因植物种子实现提高种子萌发活力的目的。
6.一种制备高萌发活力种子的方法,其特征在于通过拟南芥DNA糖苷酶AtOGG1的表达载体转化根癌农杆菌,转化的根癌农杆菌浸染植株后培养,收获的种子即为高萌发活力种子。
7.根据权利要求6所述制备高萌发活力种子的方法,其特征在于所述拟南芥DNA糖苷酶AtOGG1的表达载体制备方法如下:
(1)以拟南芥总RNA为模板,反转录得cDNA作为模板,以SEQ ID NO:1~2所示序列为引物,扩增AtOGG1基因;
(2)以扩增的AtOGG1基因为模板,以SEQ ID NO:3~4所示序列为引物,扩增含酶切位点的AtOGG1基因片段;
(3)将含酶切位点的AtOGG1基因片段与载体pGEMT-Easy进行连接,构建中间载体,转化大肠杆菌DH5α感受态,培养后挑取单克隆测序鉴定,提取鉴定正确的克隆的质粒,用Sma I和Sac I进行双酶切,回收小片段,与同样经过Sma I和Sac I进行双酶切的pBI121载体连接,得到表达载体。
8.根据权利要求6所述制备高萌发活力种子的方法,其特征在于所述根癌农杆菌为根癌农杆菌EHA105。
9.根据权利要求1所述的应用,其特征在于所述种子为水稻、小麦、玉米、大豆或拟南芥Col-0的种子。
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