[发明专利]一种利用谷胱甘肽分离混合液中半抗原的方法及应用

权利要求书

1.一种利用谷胱甘肽分离混合液中半抗原的方法，其特征在于包括如下步骤：

（1）制备固定有谷胱甘肽S转移酶的亲和层析柱；

（2）将混合液与还原型谷胱甘肽溶液充分混匀，反复通过步骤（1）制得的亲和层析柱，用高浓度还原型谷胱甘肽溶液冲洗亲和层析柱洗，洗脱结合到谷胱甘肽S转移酶上的谷胱甘肽-半抗原复合物；

（3）去除步骤（2）洗脱后的溶液中多余的谷胱甘肽，利用高效液相色谱法分离获得谷胱甘肽-半抗原复合物的各个单一组分。

2.根据权利要求1所述的一种利用谷胱甘肽分离混合液中半抗原的方法，其特征在于：所述谷胱甘肽S转移酶是末端含有6个组氨酸的重组蛋白质。

3.根据权利要求2所述的一种利用谷胱甘肽分离混合液中半抗原的方法，其特征在于，所述步骤（1）中固定有谷胱甘肽S转移酶的亲和层析柱，其制备方法是：PCR扩增pGEX4T1质粒中的谷胱甘肽S转移酶DNA序列，将其连接到pET28a（+）质粒中，转化到感受态细菌，继续培养并筛选出能正确表达谷胱甘肽S转移酶的阳性克隆，培养一定时间后破碎细胞，离心后取上清液通过镍离子亲和层析柱，将谷胱甘肽S转移酶固定在层析柱上。

4.谷胱甘肽在分离中药注射液中半抗原的应用。