[发明专利]一种杜鹃花无性系品种的育种方法

权利要求书

1.一种杜鹃花无性系品种的育种方法，其特征在于：通过人工物理诱变的方式，获得观赏价值高、开花期早的杜鹃花优良单株。

2.根据权利要求1所述的一种杜鹃花无性系品种的育种方法，其特征在于：该育种方法具体步骤包括：

(1)育种目标的确定：以抗病、较高的观赏价值为主要育种目标；

(2)育种材料的选取：选择具有较高观赏价值的品种、生长健壮且已进入开花盛期的植株为母株；从母株上采集种子后，选择饱满的、发育良好的种子，分为辐射处理组和对照组，具体为：900～1000粒种子为一组，共分为6组，其中1组为对照，5组用于辐照处理；

(3)物理诱变剂量的选择：通过预备试验，采用50、100、150、200、250Gy分别对五组用于辐照处理的种子进行⁶⁰Coγ射线的急性辐射，以无辐射处理组为对照，剂量率为10Gy/min；

(4)种子的播种：种子播种于25～30cm、高度20～25cm的塑料容器中，基质为体积比为6∶4的泥炭和谷壳的混合物，基质装盆即塑料容器前用高压灭菌锅进行消毒，盆土量为800～1500g，基质含有有机质35～45g·kg^-1，碱解氮100～120mg·kg^-1，速效磷80～95mg·kg^-1，速效钾200～250mg·kg^-1，pH6.0～6.5；基质上面平铺0.8～1.2厘米厚剪碎的苔藓，然后浇透水；将辐射处理和对照的种子均匀播种于苔藓上，每盆180～200粒；容器苗置于连栋大棚内，大棚内的温度保持在20～25℃，种子萌芽期间大棚内的空气相对湿度保持90～95％，以促萌芽，种子萌发后降至65～75％，以减少病害；播种后土壤保持湿润，土壤相对湿度保持65～75％；

(5)苗木的管理：播种后14～15天发芽，当小苗长至2～3叶时移植于小容器中，选用无纺布网袋容器单株定植，容器直径为4～5cm，高度8～10cm，基质同步骤(4)中基质；容器苗同样置于连栋大棚内，大棚内的温度保持在20～25℃，土壤相对湿度保持在65～75％；根据苗木的生长状况第2年以后进行换盆，培育3～6年后植株开花；

(6)变异单株的筛选：在苗木生长期间，仔细观测不同处理的生物学、植物学性状，选择与对照在抗性、植物生长势、花方面有明显差异的单株；

(7)变异性状的分子鉴别：选择优良单株，采集该优良单株与对照组单株的幼嫩叶片，采用改良的CTAB法提取西洋杜鹃植物基因组DNA，利用SRAP标记技术进行变异基因分析；

(8)优良单株的区域试验和推广：通过生物学、植物学性状以及观赏特性的观测，结合分子鉴别，获得优良单株；将该单株进行无性繁殖，选择不同的区域进行试验，以明确其适种范围，并总结适合该单株的一整套栽培措施。

3.根据权利要求2所述的一种杜鹃花无性系品种的育种方法，其特征在于：步骤(2)中选取育种材料的品种为“皋月”、“白佳人”、“雪美人”、“紫云”中的一种。

4.根据权利要求2所述的一种杜鹃花无性系品种的育种方法，其特征在于：步骤(2)中母株上种子的采集以秋季或春季母株的果实果皮变为褐色或黄褐色时采集。

5.根据权利要求2所述的一种杜鹃花无性系品种的育种方法，其特征在于：步骤(4)所述的盆土量为1000g，基质含有有机质38g·kg^-1，碱解氮110mg·kg^-1，速效磷87mg·kg^-1，速效钾237mg·kg^-1，pH 6.3。

6.根据权利要求2所述的一种杜鹃花无性系品种的育种方法，其特征在于：步骤(7)中所述SRAP标记技术进行变异基因分析其西洋杜鹃花SRAP-PCR反应体系为：20μL PCR反应体积中，MgCl₂ 1.75mmol/L，dNTPs0.175mmol/L，Taq聚合酶1.5U，引物0.2μmol/L，10×Buffer 2.0μL，DNA基因组为1.5M。