[发明专利]一种杜鹃花无性系品种的育种方法

说明书

技术领域

本发明涉及到林木育种技术领域，具体指利用现代生物技术(物理诱变)手段获得杜鹃花优良无性系品种即一种杜鹃花无性系品种的育种方法。

背景技术

西洋杜鹃(Rhododendron simsii Planch)，简称西鹃，又名比利时杜鹃。西洋杜鹃是我国优良的观花植物，其品种多样，花色丰富，形态各异。鉴于杜鹃自身的生物学特性，它具有极高的观赏和园林应用价值。目前，国内外对杜鹃花良种的选育方法主要是对野生资源进行引种驯化，并与栽培品种进行杂交来选育新品种，但是这种方法较为复杂、获得优良品种的成功概率较低。随着现代生物技术的发展，使用组织培养技术、诱变技术、分子标记技术和转基因技术等新型育种技术培育新品种已经成为可能，但成功报道的例子甚少。

自然界西洋杜鹃容易产生芽变，目前栽培中部分优良品种由自然芽变选择培育成功，但自然芽变概率较低，利用人工诱变可以大大提高西洋杜鹃的变异概率，是选育西洋杜鹃优良品种的良好途径，但是利用人工诱变育种西洋杜鹃的方法还鲜有报道。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是针对现有技术的状况，提供一种西洋杜鹃无性系品种选育的方法。

本发明解决上述技术问题所采用的技术方案为：一种西洋杜鹃无性系品种选育的方法，主要采用人工物理诱变的方式，获得观赏价值高、开花期早的优良单株，该方法包括育种目标的确定、育种材料的选取、物理诱变剂量的选择、苗木的管理、变异单株的筛选、变异性状的分子鉴别等，具体包括下述步骤：

(1)育种目标的确定：以抗病、较高的观赏价值(如不同的花型、花色，较长的开花期等)为主要育种目标；

(2)育种材料的选取：选择具有较高观赏价值的品种(系)、生长健壮且已进入开花盛期的植株为母株(一般秋季或春季母株的果实果皮变为褐色或黄褐色时便可采集；浙江省一般在早春蒴果开裂前采集)，从母株上采集种子后，选择饱满的、发育良好的种子，分为辐射处理组和对照组；具体为：900～1000粒种子为一组，共分为6组，其中1组为对照(不采用辐射处理)，5组用于辐照处理；

(3)物理诱变剂量的选择：通过预备试验，采用50、100、150、200、250Gy分别对五组(一组对应一个剂量)用于辐照处理的种子进行⁶⁰Coγ射线的急性辐射，以无辐射处理组为对照，剂量率为10Gy/min；

(4)种子的播种：种子播种于25～30cm、高度20～25cm的塑料容器中，基质为泥炭和谷壳的混合物(体积比为6∶4)，基质装盆(塑料容器)前用高压灭菌锅进行消毒，盆土量为800～1500g，基质含有有机质35～45g·kg^-1，碱解氮100～120mg·kg^-1，速效磷80～95mg·kg^-1，速效钾200～250mg·kg^-1，pH6.0～6.5；基质上面平铺0.8～1.2厘米厚剪碎的苔藓，然后浇透水；将辐射处理和对照的种子均匀播种于苔藓上，每盆180～200粒；容器苗置于连栋大棚内，大棚内的温度保持在20～25℃，种子萌芽期间大棚内的空气相对湿度保持90～95％，以促萌芽，种子萌发后降至65～75％，以减少病害；播种后土壤保持湿润，土壤相对湿度保持65～75％；

(5)苗木的管理：播种后14～15天发芽，当小苗长至2～3叶时移植于小容器中，选用无纺布网袋容器单株定植，容器直径为4～5cm，高度8～10cm，基质同步骤(4)中基质；容器苗同样置于连栋大棚内，大棚内的温度保持在20～25℃，温度过高用遮阳网遮荫，土壤相对湿度保持在65～75％；根据苗木的生长状况第2年以后进行换盆，培育3～6年后植株开花；

(6)变异单株的筛选：在苗木生长期间，仔细观测不同处理的生物学、植物学性状，选择与对照(对照组)在抗性、植物生长势、花(花色、花型、花期等)方面有明显差异的单株；

(7)变异性状的分子鉴别：选择优良单株，采集该优良单株与对照组单株的幼嫩叶片，采用改良的CTAB法提取西洋杜鹃植物基因组DNA，利用SRAP标记技术进行变异基因分析；

(8)优良单株的区域试验和推广：通过生物学、植物学性状以及观赏特性的观测，结合分子鉴别，获得优良单株；将该单株进行无性繁殖(如扦插、嫁接)，选择不同的区域进行试验，以明确其适种范围，并总结适合该单株的一整套栽培措施。

步骤(2)中选取育种材料的品种如“皋月”、“白佳人”、“雪美人”、“紫云”等。