[发明专利]鉴别蛇皮果性别的DNA片段、引物和方法有效
申请号: | 201210004925.4 | 申请日: | 2012-01-06 |
公开(公告)号: | CN102433389A | 公开(公告)日: | 2012-05-02 |
发明(设计)人: | 尹天光;李荣生;李发根;杨锦昌;邹文涛;李建光 | 申请(专利权)人: | 中国林业科学研究院热带林业研究所 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68;C12N15/11 |
代理公司: | 广州科粤专利商标代理有限公司 44001 | 代理人: | 刘明星 |
地址: | 510520 广东*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 鉴别 蛇皮 性别 dna 片段 引物 方法 | ||
1.鉴定蛇皮果性别的DNA特异性片段,其特征在于,其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。
2.鉴别蛇皮果性别的鉴定引物,其特征在于,由LF4:5′-AGCACAGCCTAGTTAGTT-3′和LR4:5′-TGACACCTCCTCCCATAT-3′组成。
3.一种蛇皮果性别鉴定方法,其特征在于,包括以下步骤:常规提取蛇皮果样品的基因组DNA,以其作为模板,以LF4:5′-AGCACAGCCTAGTTAGTT-3′,LR4:5′-TGACACCTCCTCCCATAT-3′作为引物进行PCR反应,将PCR产物进行电泳检测,电泳结果中出现一段1579bp条带的样品为雄株,而相同部位没有出现条带的样品为雌株。
4.根据权利要求3所述的蛇皮果性别鉴定方法,其特征在于,所述的PCR反应为:PCR反应体系为15μL,反应液中含10×buffer 1.5μL、dNTPs 0.12mmol/L、Taq DNA聚合酶0.10U/μL、MgCl2 1.4mmol/L、引物LF4和引物LR4各0.3μmol/L、12ng蛇皮果基因组DNA模板;反应程序为:94℃预变性2分钟;94℃30秒、39℃30秒、72℃2分钟,40个循环;72℃延伸10分钟。
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