[发明专利]高纯茶黄素复合物的制备方法无效
申请号: | 201210007418.6 | 申请日: | 2012-01-12 |
公开(公告)号: | CN102605016A | 公开(公告)日: | 2012-07-25 |
发明(设计)人: | 王坤波;刘仲华;黄建安;刘芳;龚雨顺 | 申请(专利权)人: | 湖南农业大学 |
主分类号: | C12P17/16 | 分类号: | C12P17/16;C07D311/62 |
代理公司: | 长沙正奇专利事务所有限责任公司 43113 | 代理人: | 何为;袁颖华 |
地址: | 410128 湖南*** | 国省代码: | 湖南;43 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 高纯 黄素 复合物 制备 方法 | ||
1.一种高纯茶黄素复合物的制备方法,其特征在于:该方法包括如下步骤:
A、按1g绿茶儿茶素混合物加75~100ml多酚氧化酶粗酶液的比例,将绿茶儿茶素混合物加入多酚氧化酶粗酶液中,通入氧气,以气泡不溢出反应容器为宜,搅拌,20~40℃恒温水浴反应20~40min,立即用等体积的预冷至-18~-20℃的乙酸乙酯萃取,酯层在40~45℃真空浓缩,回收乙酸乙酯,干燥,得茶黄素粗品;
B、按1g茶黄素粗品加10~15ml 20%体积浓度的乙醇水溶液的比例,将上述茶黄素粗品用乙醇水溶液溶解,将溶解液以0.6~0.8BV/h的流速通过装有吸附树脂的层析柱至吸附饱和,先用2~3BV 20%体积浓度的乙醇水溶液以0.8~1.0BV/h的流速洗脱,再用2~3BV 60%体积浓度的丙酮或乙醇水溶液以0.8~1.0BV/h的流速洗脱,收集60%体积浓度的丙酮或乙醇水溶液洗脱液,将洗脱液在40~45℃真空浓缩,回收丙酮或乙醇,冷冻干燥,得高纯茶黄素复合物;
上述乙酸乙酯、乙醇和丙酮皆为分析纯。
2.如权利要求1所述的高纯茶黄素复合物的制备方法,其特征在于:所述绿茶儿茶素混合物为EGC和EC含量高的儿茶素混合物或小叶儿茶素混合物。
3.如权利要求1所述的高纯茶黄素复合物的制备方法,其特征在于:所述多酚氧化酶粗酶液是取于-18~-20℃冷冻的梨果实去皮切碎,然后用预冷至-18~-20℃、pH 5.5的磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲液进行匀浆提取多酚氧化酶,过滤离心,上清液即为多酚氧化酶粗酶液;酶液置于0~4℃环境中待用,提取时,梨果实与磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲液的比例为1g∶1~2ml。
4.如权利要求1所述的高纯茶黄素复合物的制备方法,其特征在于:所述吸附树脂为30~60目的聚酰胺粉或NKA大孔吸附树脂。
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