[发明专利]一种色木槭腋芽途径组织培养的方法

说明书

技术领域

本发明涉及色木槭(Acer mono Maxim)组织培养繁殖方法，属于木本植物种苗繁殖的技术领域。

背景技术

色木槭(Acer mono Maxim)属槭树科(Aceraceae)槭树属(Acer)植物。又名五角槭，落叶乔木，高15-20m；树皮粗糙，常纵裂，灰褐色；小枝细瘦，无毛，当年生嫩枝绿色或紫绿色，多年生枝灰色或淡灰色，具圆形皮孔；冬芽近于球形，鳞片卵形。叶对生叶柄长4-6cm，细瘦，无毛；叶片纸质，外貌近椭圆形，长6-8cm，宽9-11cm，5裂，有时3裂及7裂同生一树；裂片卵形或宽三角形，长渐尖，全缘，无毛，仅主脉腋间有簇毛，主脉5条，在上面显着，侧脉两面均不显着，上面光绿色，下面淡绿色。花多数，杂性，雄花与两性花同株，多数常成圆锥状，伞房花序顶生，无毛；花带绿黄色，总花梗长1-2cm；萼片5，长圆形，黄绿色；花瓣5，椭圆形，淡白色；雄蕊8，无毛，比花瓣短，花药黄色；子房无毛，在雄花中不发育，花柱无毛，柱头2裂，反卷。翅果嫩时紫绿色，成熟时淡黄色，小坚果压扁状，长1-1.3cm，宽5-8mm；翅长圆形，宽5-10mm，连同小坚果长2-2.5cm，张开成锐角或近于钝角，花期5月，果期9月。主要自然分布于东北、华北、华中、华东、西南各地。由于色木槭树势优美，枝叶浓密，叶形秀丽，嫩叶红色，入秋变成橙黄或红色，甚为美观。因此，该树种无论栽植于何处，无不感到引人入胜，在园林中既可以作为很好的有色树种植于草坪、土丘、溪边、池畔等地，又可以作为行道树利用。此外，色木槭木材纹理清晰，结构细而均匀，木质重、硬、耐腐，易加工，切面光滑，弹性好，是制作高档家具、乐器、农具和胶合板的上好材料。

目前国内对色木槭的研究与开发应用较少。对于其快速繁殖和栽培管理的研究尚处于空白。色木槭目前以种子繁育为主，相关研究表明色木槭靠种子繁殖的实生苗变异比较大，形状不稳定，因此市场上种苗资源极其短缺。扦插与嫁接还在试验之中，槭树科种子饱满率极低，仅万分之几。这样不仅繁殖系数小，而且成苗时间大大延长，很难形成规模，，满足不了市场的需求。

木本植物组织培养研究起步于20世纪50年代初，直到70年代后期才得到较大的发展。组织培养获得再生植株主要分为两种途径，其一为广义组织培养，即从植物体分离出符合需要的器官等，通过无菌操作，在人工控制条件下进行培养以获得再生的完整植株；其二为狭义组织培养，即在培养过程中从各器官上产生愈伤组织，培养愈伤组织再经过再分化形成再生植物。

目前，不完全统计有90多属300多种木本植物经组织培养获得再生植株。而关于槭树属植物组织培养的研究，国内外报道很少。近5年，仅见有报道对色木槭嫩茎(见植物生理学通讯，2008年第2期，色木槭的组织培养及快繁技术)、对红翅槭以嫩茎(见北方园艺，2010年第9期，红翅槭的组织培养及快繁技术)和嫩叶(见中南林业科技大学学报，2010年第4期，景观树种红翅槭愈伤组织诱导培养)为外植体进行愈伤组织的诱导培养，而关于色木槭的腋芽(器官)途径离体快繁研究尚未见有报道。

综上所述，采取组织培养繁殖色木槭是解决色木槭资源短缺的重要途径之一，对色木槭的开发和推广利用都具有着非常重要的意义。

发明内容

本发明主要解决的技术问题是公开色木槭的腋芽途径组织培养繁殖方法。

为解决该技术采用如下的技术方案：

A)外植体消毒：9月中上旬取色木槭一年生扦插苗当年生枝条上带腋芽的茎段为外植体，用清水冲洗干净，清洗后放入质量浓度为3％的H2O2中浸泡15～20分钟，取出立即转入含质量浓度为1～5％吐温-80的0.1％HgCI2溶液中浸泡10～20分钟，然后取出用无菌水冲洗5～6次并用灭菌吸水纸将水吸干。

B)腋芽萌动：取消毒后的外植体切割为1.0-1.5cm长的茎段，其中每个茎段带一个腋芽，将茎段接种于诱导培养基WPM+6-BA1.0mg/L+IBA0.01mg/L+PVP500mg/L+GA₃1.0mg/L PH6.0中进行腋芽的萌发诱导，控制培养温度在25℃，进行光照培养20d，所述光照培养为：光照时间10-16h/d，光照强度为1600-2000lx；

C)继代培养：将步骤B)中所得色木槭嫩梢切割后接入继代培养基WPM+6-BA0.3mg/L+IBA0.05mg/L+PVP500mg/L PH6.0中进行继代培养30d，培养温度25℃，光照时间10-16h/d，光照强度为1600-2000lx；