[发明专利]一种从胶原蛋白制备RGD活性多肽的方法

权利要求书

1.一种从胶原蛋白制备RGD活性多肽的方法，其特征在于步骤如下：

（1）将胶原蛋白溶于水，调节pH值为7.0~9.0；

（2）酶解：在胶原蛋白水溶液中加入胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶或胃蛋白酶，加入量为胶原蛋白质量的1/5000~5/100， 30~45℃条件下酶解，酶解时间为0.5~8小时，用2,4,6-三硝基苯磺酸衍生-分光光度法测定酶解液吸光度，当吸光度不再增长时视为酶解完成，升高温度到55~65℃保温10~30分钟使胰蛋白酶失活，终止反应，得到胶原蛋白酶解液；

（3）过滤：在15~60℃温度范围内，采用截留分子量为3,000~20,000道尔顿的滤膜过滤或采用凝胶过滤色谱法过滤，收集滤液得到胶原蛋白多肽溶液；

（4）将胶原蛋白多肽溶液依次通过亲和色谱柱和反相色谱柱，收集洗脱液，冷冻干燥，所得粉末即为RGD活性多肽。

2.根据权利要求1所述从胶原蛋白制备RGD活性多肽的方法，其特征在于步骤（2）所述胶原蛋白为动物源未降解的完整胶原蛋白，或者经过酸法、碱法、酶法处理过的胶原蛋白，或直接采用明胶。

3.根据权利要求1所述从胶原蛋白制备RGD活性多肽的方法，其特征在于步骤（2）在胶原蛋白水溶液中加入胰蛋白酶，胰蛋白酶比活为1,000-5,000 U/mg。

4.根据权利要求1所述从胶原蛋白制备RGD活性多肽的方法，其特征在于步骤（3）滤膜截留分子量为5,000道尔顿。

5.根据权利要求1所述从胶原蛋白制备RGD活性多肽的方法，其特征在于步骤（3）凝胶过滤色谱法用到的凝胶过滤色谱柱有效分离范围为3,000~100,000道尔顿。

6.根据权利要求1所述从胶原蛋白制备RGD活性多肽的方法，其特征在于步骤（4）所述亲和色谱柱是以整合素作为配基的。

7.权利要求1~6任意一项所述方法制备得到的RGD活性多肽。

8.权利要求7所述RGD活性多肽在制备RGD活性多肽药物、RGD活性多肽食品或RGD活性多肽化妆品中的应用。