[发明专利]一种一菌多酶菌株及其筛选方法和应用有效
申请号: | 201210010890.5 | 申请日: | 2012-01-15 |
公开(公告)号: | CN102864091A | 公开(公告)日: | 2013-01-09 |
发明(设计)人: | 刘一尘;张谦;李宏伟;张春杰;汪洋;关随霞;龚婷;丁轲;李小康;吴庭才;李银聚;王臣 | 申请(专利权)人: | 河南科技大学 |
主分类号: | C12N1/20 | 分类号: | C12N1/20;C12Q1/04;C12N9/56;A23K1/165;C12R1/125 |
代理公司: | 郑州睿信知识产权代理有限公司 41119 | 代理人: | 牛爱周 |
地址: | 471003 河*** | 国省代码: | 河南;41 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 一菌多酶 菌株 及其 筛选 方法 应用 | ||
1.一种一菌多酶菌株,其特征在于,该菌株为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)1.1111,保藏于中国典型培养物保藏中心,其保藏号为CCTCC NO:M 2011286。
2.根据权利要求1所述的一菌多酶菌株,其特征在于:可产木聚糖酶、淀粉酶、纤维素酶、蛋白酶、植酸酶、果胶酶、脂肪酶、甘露葡聚糖酶、糖化酶,其中蛋白酶、甘露葡聚糖酶、淀粉酶和糖化酶为高产酶活。
3.一菌多酶菌株的筛选方法,其特征在于:包括以下步骤:以产木聚糖酶、淀粉酶、纤维素酶、蛋白酶、植酸酶、果胶酶、脂肪酶、甘露葡聚糖酶、糖化酶为筛选目标,分别用各酶选择性培养基,根据菌落周围有无透明圈或水解圈,以及透明圈或水解圈的直径(D)与菌落直径(d)的比值,来初步判断是否为产酶菌株及高产酶活,最终从实验室分离、筛选保存的菌种资源库中筛选到一菌产多酶的菌株。
4.一菌多酶菌株在制备益生菌剂方面的应用。
5.根据权利要求4所述的应用,其特征在于:斜面和种子培养基以g/L计:蛋白胨10.0,牛肉膏5,NaCl 5,斜面再加15-20,pH7.2;发酵培养基以g/L计:玉米粉36-44,豆饼粉36-44,Na2HPO4 8,(NH4)2SO4 4,NH4Cl 0.75,CaCl2 1.0,pH7.0;培养条件:10L发酵罐中发酵体积为7L,接种量为总体积10%,温度为35-40℃,通气量为3L/L.min,搅拌速度为200-300r/min,发酵时间30-50h,发酵液中有大量的枯草芽孢杆菌活菌、以蛋白酶、甘露葡聚糖酶、淀粉酶和糖化酶为主,同时含有木聚糖酶、淀粉酶、纤维素酶、植酸酶、果胶酶、脂肪酶等水解酶,将发酵液浓缩加入30%-60%淀粉干燥即制成益生菌和复合酶制剂。
6.一菌多酶菌株在制备饲料方面的应用。
7.根据权利要求6所述的应用,其特征在于:复合酶制剂在饲料中的添加量为每吨饲料加100-200g。
8.根据权利要求6所述的应用,其特征在于:所述的复合酶制剂组成为蛋白酶5000-10000U/g、甘露葡聚糖酶1000-3000U/g、糖化酶700-3000U/g,木聚糖酶7500-15000U/g、淀粉酶500-3000U/g、纤维素酶200-700U/g、植酸酶50-80U/g、果胶酶100-200U/g、脂肪酶200-500U/g。
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