[发明专利]一种对日本血吸虫病肝纤维化具有治疗作用的DNA疫苗及其应用

权利要求书

1.一种对日本血吸虫病肝纤维化具有治疗作用的DNA疫苗，其特征在于，以具有免疫靶向和抗血吸虫卵胚作用的单链抗体scFv与细胞因子IL-18DNA融合，转入真核表达载体构成，所述的具有免疫靶向和抗血吸虫卵胚作用的单链抗体的核苷酸序列为SEQ ID NO：1。

2.根据权利要求1所述的DNA疫苗，其特征在于：所述的DNA疫苗制备如下：以具有免疫靶向和抗血吸虫卵胚作用的单链抗体scFv和细胞因子IL-18DNA为模板，同时根据两个模板和两个模板之间45bp的链接片段glycine-rich linker[(Gly₄Ser)₃]设计特异性引物，经PCR扩增分别得到scFv+linker和lingker+IL-18DNA，随后经重叠PCR扩增得到scFv和IL-18融合DNA:scFv-IL18；将其转入真核表达载体pVAX1即得。

3.根据权利要求2所述的DNA疫苗，其特征在于：

扩增scFv+linker的引物序列为：

SEQ ID NO：2：

P1：5’-CGGAATTCAGCATGGCCCAGGTGCAGC-3’

SEQ ID NO：3：

P2：5′-CCGTTTGATTTCCA-3′；

扩增lingker+IL-18的引物序列为：

SEQ ID NO：4：

P3：5′-ATGGCTGCFGAACCAGTAG-3

SEQ ID NO：5：

P4：5′-CCGCTCGAGTTAATAGCTAGTCTTCGCTTTG-3′。

4.根据权利要求1所述的DNA疫苗，其特征在于：所述的DNA疫苗中的scFv和IL-18融合DNA:scFv-IL18的核苷酸序列为SEQ ID NO：6。

5.根据权利要求1所述的DNA疫苗，其特征在于：所述的DNA疫苗中的scFv和IL-18融合DNA:scFv-IL18的氨基酸序列为SEQ ID NO：7。

6.权利要求1-5任意一项所述的DNA疫苗的应用方法，其特征在于，用于制备治疗日本血吸虫病肝纤维化药物。