[发明专利]厚叶岩白菜组培苗低温保存方法有效
申请号: | 201210012448.6 | 申请日: | 2012-01-16 |
公开(公告)号: | CN102524071A | 公开(公告)日: | 2012-07-04 |
发明(设计)人: | 刘敏;王卉;王晓军;努尔波拉提;郝秀英;康喜亮;徐琴;陈艳瑞 | 申请(专利权)人: | 中国科学院新疆理化技术研究所 |
主分类号: | A01H4/00 | 分类号: | A01H4/00 |
代理公司: | 乌鲁木齐中科新兴专利事务所 65106 | 代理人: | 张莉 |
地址: | 830011 新疆维吾尔*** | 国省代码: | 新疆;65 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 厚叶岩 白菜 组培苗 低温 保存 方法 | ||
1.一种厚叶岩白菜组培苗低温保存方法,其特征在于按下列步骤进行:
a、将厚叶岩白菜新鲜叶片用0.5-1g/L洗洁精或洗衣粉水溶液仔细擦洗表面,再用自来水流动冲洗10min,然后将叶片在超净工作台上用浓度为75%酒精表面消毒30s,将0.1%升汞中加入吐温-802-3滴灭菌5-12min,再用含有0.2%的Na2S2O3无菌水冲洗3-5次;
b、将步骤a消毒后的厚叶岩白菜叶片切成0.8-1.2cm2的小块作为外植体,接种于固体培养基上进行愈伤诱导;
c、将步骤b中形成的愈伤组织,转入增殖固体培养基B5+1.0mg/LNAA+1.0mg/LIBA+0.05mg/L6-BA诱导出芽,继代两次;d、将步骤c中诱导出芽的厚叶岩白菜无菌苗移入冷藏固体培养基B5+0.1mg/L NAA+0.5mg/L 6-BA+0.01mg/L IBA+25-45g/L葡萄糖+10-40mg/L甘露醇+5.5g/L琼脂中;
e、将步骤d中长势强壮的单苗,移入50毫升冷藏固体培养基底部,放置海尔SC-279GA透明门立式冷藏柜进行低温冷藏,由冷藏柜里的照明灯,每天16小时照射,8-12个月后,在温度20℃下进行组培苗的缓苗继代,30天后长出新芽即可。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于步骤b固体培养基为B5+3%蔗糖+1.0mg/L NAA+1.0mg/L 6-BA+100mg/L水解酪蛋白+0.2%聚乙烯吡咯烷酮+100mg/L Na2S2O3。
3.根据权利要求1所述的方法,其特征在于步骤e低温冷藏温度为1-9℃。
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