[发明专利]同时检测泰乐菌素和替米考星残留分析的免疫胶体金试纸条及其制备方法无效
申请号: | 201210013856.3 | 申请日: | 2012-01-17 |
公开(公告)号: | CN102590516A | 公开(公告)日: | 2012-07-18 |
发明(设计)人: | 乐涛;徐建;牛晓东 | 申请(专利权)人: | 重庆师范大学 |
主分类号: | G01N33/577 | 分类号: | G01N33/577 |
代理公司: | 重庆市前沿专利事务所 50211 | 代理人: | 郭云 |
地址: | 401331 重庆市*** | 国省代码: | 重庆;85 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 同时 检测 菌素 替米考星 残留 分析 免疫 胶体 试纸 及其 制备 方法 | ||
1.一种同时检测泰乐菌素和替米考星残留分析的免疫胶体金试纸条,包括背板(2),该背板(2)上设置手控区、测试区和样品端,所述测试区位于背板(2)中部,所述手控区和样品端位于背板(2)两个端部,其特征在于:所述手控区由吸水垫(3)和手控区封膜(1)组成,所述吸水垫(3)粘附在背板(2),该吸水垫(3)上表面及外端面和背板(2)外端面粘附手控区封膜(1),所述测试区为粘附在背板(2)上的硝酸纤维素膜(4),所述硝酸纤维素膜(4)上包被有兔抗鼠的IgG质控线(5)和包被有DES-BSA检测线(6),所述样品端由结合垫(7)、样品垫(8)和样品端封膜(9)组成,所述背板(2)上由测试区到外端依次粘附结合垫(7)和样品垫(8),该样品垫(8)搭在结合垫(7)上,所述样品垫(8)上表面及外端面和背板(2)外端面粘附样品端封膜(9)。
2.一种如权利要求1所述同时检测泰乐菌素和替米考星多残留胶体金免疫层析试纸条的制备方法,其特征在于按如下步骤进行:
1)将半抗原去碳霉糖泰乐菌素与牛血清白蛋白偶联合成偶联物DES-BSA;
2)将步骤1)合成的2种偶联物免疫原免疫小鼠,通过细胞融合筛选得到抗TYL和TIL药物单克隆细胞株,分别将得到单克隆细胞株注射小鼠腹腔,得到抗TYL和TIL药物单抗体,该抗体与TYL和TIL有较高的交叉反应;
3)用柠檬酸三钠与氯金酸反应制备胶体金;
4)提取小鼠IgG免疫健康家兔,得到兔抗鼠IgG抗体;
5)将步骤2)制成的抗TYL和TIL单克隆抗体加入步骤3)制备的胶体金中,得到抗TYL和TIL单克隆抗体-胶体金标记物;
6)将抗TYL和TIL单克隆抗体-胶体金标记物包被在结合垫上;
7)将步骤1)合成DES-BSA分别包被在硝酸纤维素膜(4)得到检测线(6);
8)将步骤4)兔抗鼠IgG包被在硝酸纤维素膜(4)得到质控线(5);
9)将手控区封膜(1)、吸水垫(3)、硝酸纤维素膜(4)结合垫(7)、样品垫(8)和样品端封膜(9)依次粘贴在背板(2)上。
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