[发明专利]一种制备南极磷虾低氟水解多肽的方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种从南极磷虾粉中制备小分子多肽的方法，特别是低氟水解多肽的制备方法。

背景技术

南极磷虾是地球上资源量最大的生物品种之一。据统计，南极磷虾资源的生物量保守估算约有6.5～10亿吨。南极磷虾是迄今为止人类所发现的生物中蛋白含量最高的物种，蛋白含量高且优，磷虾肉的蛋白质含量为17.65％，干磷虾则高达65％，是其他动物性食物的二至三倍。南极磷虾含有人体所必需的全部氨基酸，尤其是赖氨酸的含量非常丰富，占蛋白质含量的9.73％。南极磷虾酶解液中富含各种氨基酸、活性肽类、有机酸等，尤其是两种人体需求量较大的赖氨酸和亮氨酸，还含有大量的高活性的血管紧张素转化酶(ACE)抑制肽，易于吸收，可以作为一种良好的人体氨基酸营养补充剂。也含有大量的高活性的血管紧张素转化酶(ACE)抑制肽和抗氧化肽等，在预防衰老、降血压、预防心脑血管疾病和防止动脉粥样硬化中有重要作用。

但是南极磷虾中存在氟含量过高的问题，中国海洋大学和大连理工大学分别于2010年和2011年申请了采用酸碱沉淀法制备南极磷虾低氟蛋白的专利。同样，南极磷虾水解多肽也存在氟含量过高的问题，限制了南极磷虾的进一步加工利用，因此开发南极磷虾低氟水解多肽技术极其重要。目前关于南极磷虾水解多肽产品中氟的脱除研究报道很少，中国海洋大学分别采用纳滤技术、电渗析技术和氯化钙沉降法脱除酶解液中的氟，采用纳滤技术和电渗析的方法脱氟，总氮和氨基氮等营养成分损失比较严重，总氮损失在15～20％以上，综合效果不理想。采用氯化钙沉降法脱氟，氯化钙的添加量为溶液质量的1.38％，然后又要调节溶液pH值，调节溶液pH值就又要反复增加其他酸碱性的成分，虽然离心后最终酶解多肽的氟含量可以达到20～30mg/kg，总氮损失约在8％；但是采用这种方法，氯化钙的添加量比较大，容易造成多余的钙的残留，除去过多的钙又会引起有效成分及营养成分的损失，浪费能源，而且工艺过程复杂，在混合氯化钙后需要调节pH值。

发明内容

本发明提供了一种制备南极磷虾低氟水解多肽的方法，脱氟工艺使用的氧化钙量小，脱氟率可以达到95％～99.6％以上，操作简单易行，且耗时短，过量的钙随着分离沉淀物就基本消除，对酶解液的营养成分影响较小，最后可以制备出氟含量为10～30ppm的南极磷虾低氟水解活性多肽，具有很高的实际应用价值。

本发明的技术方案是：一种制备南极磷虾低氟水解多肽的方法，将南极磷虾粉与水按照质量比为1∶1～1∶10的比例混合成磷虾悬浊液，对磷虾悬浊液进行保温酶解后灭酶，分离上清液，其特征是：在分离的上清液中添加溶液质量的0.1％～1.5％的氧化钙进行脱氟，脱氟处理后再分离出上清液，并对上清液进行浓缩至水解多肽的浓度为10％～40％；用盐酸调节pH值为5.5～7.0，然后进行干燥制备出氟含量为10～30mg/kg的南极磷虾低氟水解多肽。本发明的这种制备南极磷虾低氟水解多肽的方法，具体包括以下步骤：

(1)混合：将新鲜的南极磷虾或油脂含量为0～30％的南极磷虾干粉与水按照质量比为1∶1～1∶10的比例混合，然后搅拌均匀；

(2)酶解：对混合后的磷虾悬浊液进行保温酶解，选用合适的蛋白酶进行水解；

(3)灭酶：酶解一定时间后，采用加热或微波的方式进行灭酶，时间为1～30分钟；

(4)离心：待灭酶后的溶液冷却后进行离心分离，转速为1000～8000rpm，温度为0～40℃；

(5)脱氟：脱氟：对离心后的上清液进行脱氟，添加溶液质量的0.1％～1.5％的氧化钙，搅拌均匀，形成液体静置；

(6)离心：脱氟处理后的液体进行离心，转速为1000～8000rpm，温度为3～50℃；

(7)浓缩：对离心后的上清液进行浓缩，至浓度为10％～40％；

(8)干燥：将离心后的上清液用氢氧化钠调节pH值为5.5～7.0，然后进行干燥，干燥后制备出氟含量为10～30mg/kg的南极磷虾低氟水解多肽，脱氟率可以达到95％～99.6％。