[发明专利]一种活性灵芝多糖肽对照品、制备方法及应用有效
申请号: | 201210016288.2 | 申请日: | 2012-01-19 |
公开(公告)号: | CN102584963A | 公开(公告)日: | 2012-07-18 |
发明(设计)人: | 王赛贞;林占熺;林冬梅;林志彬;林树钱;吕松涛;罗虹建;林辉 | 申请(专利权)人: | 福建农大菌草技术开发公司;福州绿谷生物药业技术研究所;王赛贞;林占熺;林冬梅;林志彬;林树钱;吕松涛;罗虹建;林辉 |
主分类号: | C07K14/37 | 分类号: | C07K14/37;C07K1/36;C07K1/34;C07K1/30;C07K1/16;G01N30/02;G01N21/31 |
代理公司: | 福州展晖专利事务所 35201 | 代理人: | 林天凯 |
地址: | 350000 福建*** | 国省代码: | 福建;35 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 活性 灵芝 多糖 对照 制备 方法 应用 | ||
技术领域
本发明涉及一种灵芝及灵芝产品质量测定用对照品,特别是一种活性灵芝多糖肽(GL-PPS)对照品、制备方法及应用。
背景技术
现有测定灵芝及灵芝产品质量方法,根据中国药典规定蒽酮-硫酸法,适用于以葡聚糖为主要结构,相对分子质量1×104以上的水溶性粗多糖的测定。该法以葡萄糖或葡聚糖为对照品,以无水葡萄糖或葡聚糖计,而忽视有药用价值的多糖肽活性成分的含量。特别是灵芝提取物生产工艺过程中,往往在灵芝提取液中加入淀粉,或其它淀粉类辅料,使该法无法排除辅料干扰,造成灵芝产品的多糖含量虚高的问题,从而造成不能真实反映灵芝产品的质量。
2002年王光亚等提出多糖测定最好能提出样品中所含多糖的纯品作对照品,用HPLC法来分离检测(王光亚主编,保健食品功效成分检测方法,中国轻工业出版社,2002年,P10)。为此,我们根据这思路,提取分离灵芝活性成分多糖肽(GL-PPS)。
发明内容
本发明的目的在于克服现有技术的不足之处,而提供一种可用于检测灵芝和灵芝深加工产品中多糖肽含量,从而可提高灵芝产品质量的一种活性灵芝多糖肽(GL-PPS)对照品。
本发明的另一目的在于提供一种活性灵芝多糖肽(GL-PPS)对照品的制备方法。
本发明的目的还在于提供一种活性灵芝多糖肽(GL-PPS)对照品在检查灵芝产品质量中的应用。
一种活性灵芝多糖肽(GL-PPS)对照品,其具有如下特征:
(1)性状:浅褐色至褐色粉末状;
(2)性质:易溶于水,不溶乙醇、丙酮,乙醚等,易受潮;
(3)纯度:99%以上;
(4)峰位分子量(MP)1.06~1.2×104;
(5)化学结构:鼠李糖(Rha)、甘露糖(Man)和葡萄糖(Glc)组成,含17种氨基酸,糖苷键为β-构型;
其主链是1,3-与1,4-两者交替连接的葡萄糖构成,在部分主链葡萄糖的6位有分支,非还原末端均由葡萄糖构成,也含主链由1,6或1,3连接的β-D-Glcp的构成,在部分1.6-的主链葡萄糖的2或3位有分支;
(6)GL-PPS对照品的百分摩尔比:Rha∶Man∶Glc=1.49∶9.7∶75.4;
(7)分子量范围为5.0×103~1.5×104。
一种活性灵芝多糖肽(GL-PPS)对照品的制备方法,其步骤如下:
(1)将灵芝子实体挑选,经切成薄片(2~20mm)或破碎后过40~60目筛网,加10~30倍体积的无离子水,于90℃浸泡2小时,90~100℃提取1.5~2.0h,间歇搅拌翻动,以3000~4000rpm离心,去沉淀取提取液,离心后的残渣再加5~10倍原子实体重量的水,反复提取二次,合并提取上清液;
(2)将上清液浓缩至原投料量的5~10倍,离心除去杂质,留清液,流水透析(36MD)48小时,将透析液浓缩一半,再次离心(10000-12000rpm),除去杂质,留上清液;
(3)向上清透析液中缓慢加入透析液的三倍体积95%乙醇,搅拌均后,置4~5℃冰箱收集沉淀物,将沉淀溶于水,加入其4倍体积无水乙醇,4~5℃放置,离心(10000-12000rpm),除去清液,沉淀物用丙酮和乙醚洗涤沉淀,置真空低温干燥得赤灵芝多糖肽粗品GL-PP;
(4)用浓度为1%的灵芝多糖肽GL-PP溶液,在不断搅拌中缓慢滴加无水乙醇至1∶0.5(V/v),置冰箱过夜,离心(10000-12000rpm),用无水乙醇分级沉淀,收集33%乙醇沉淀部分,置冰箱真空干燥得第1级成分为GL-PP1得率为27~30%;
(5)取步骤(4)上清液再滴加无水乙醇至1∶1(V/v)同上处理,收集33~50%的沉淀,置冰箱真空干燥得第2级成分为GL-PP2得率为20~30%;将上清液继续再加乙醇至1∶1.5(V/v),得第3级组分GL-PP3得率为20~25%。置真空低温干燥得GL-PP3多糖肽粗品;
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息,商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于福建农大菌草技术开发公司;福州绿谷生物药业技术研究所;王赛贞;林占熺;林冬梅;林志彬;林树钱;吕松涛;罗虹建;林辉,未经福建农大菌草技术开发公司;福州绿谷生物药业技术研究所;王赛贞;林占熺;林冬梅;林志彬;林树钱;吕松涛;罗虹建;林辉许可,擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作,请联系【客服】
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