[发明专利]一种青蟹眼柄RNA的提取方法有效
| 申请号： | 201210016953.8 | 申请日： | 2012-01-19 |
| 公开（公告）号： | CN102559662A | 公开（公告）日： | 2012-07-11 |
| 发明（设计）人： | 皮妍;朱厚泽;蒋科技;张凤英;于忠利;张丹;孙曼曼;房娅博;马凌波 | 申请（专利权）人： | 中国水产科学研究院东海水产研究所 |
| 主分类号： | C12N15/10 | 分类号： | C12N15/10 |
| 代理公司： | 上海泰能知识产权代理事务所 31233 | 代理人： | 黄志达;谢文凯 |
| 地址： | 200090 *** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 青蟹眼柄 rna 提取 方法 | ||
【权利要求书】：
1.一种青蟹眼柄RNA的提取方法，包括：
(1)在液氮中将青蟹标本的眼柄组织研磨成粉末，取部分加入RNAiso Plus试剂后室温静置离心，取上清液；
(2)在上述上清液中加入1/5上清液体积的氯仿，混匀，室温静置离心，获得水相、蛋白相和氯仿相，取水相；
(3)在上述水相中加入1/3水相体积的醋酸钾溶液，室温离心、静置；加入等体积的异丙醇，混匀，-70℃静置、室温离心，弃上清液保留沉淀；
(4)在上述沉淀中加入乙醇，室温离心，弃上清液保留沉淀；干燥，用DEPC水溶解沉淀，得青蟹眼柄RNA。
2.根据权利要求1所述的一种青蟹眼柄RNA的提取方法，其特征在于：所述步骤(1)中的RNAiso Plus试剂的加入量为600μl。
3.根据权利要求1所述的一种青蟹眼柄RNA的提取方法，其特征在于：所述步骤(3)中的醋酸钾溶液浓度为5mol/L，用醋酸调节pH至6.0。
4.根据权利要求1所述的一种青蟹眼柄RNA的提取方法，其特征在于：所述步骤(4)中的乙醇浓度为75vol％。
5.根据权利要求1所述的一种青蟹眼柄RNA的提取方法，其特征在于：所述步骤(4)中的DEPC水的加入量为20μl。
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