[发明专利]用于柑桔溃疡病菌检测的LAMP引物组有效
申请号: | 201210018338.0 | 申请日: | 2012-01-20 |
公开(公告)号: | CN102534016A | 公开(公告)日: | 2012-07-04 |
发明(设计)人: | 孔德英;孙涛;邓朝晖;陆丽华;吴瑜佳;赵文军;滕少娜 | 申请(专利权)人: | 重庆出入境检验检疫局检验检疫技术中心 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68;C12N15/11;C12R1/64 |
代理公司: | 重庆市恒信知识产权代理有限公司 50102 | 代理人: | 刘小红 |
地址: | 400020*** | 国省代码: | 重庆;85 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 用于 柑桔 溃疡 病菌 检测 lamp 引物 | ||
1.一种用于柑桔溃疡病菌检测的LAMP引物组,其特征在于:该引物组包括一对外引物,其DNA序列为:SEQ ID NO1、SEQ ID NO2和一对内引物,其DNA序列为:SEQ ID NO3、SEQ ID NO4。
2.一种利用权利要求1所述引物组检测柑桔溃疡病菌的方法,包括如下步骤:
1)待测样品中DNA 模板的提取:用市售的DNA提取试剂盒,按照说明书步骤提取待测样品中DNA;
2)LAMP扩增体系:10μmol/mL SEQ ID NO1、10μmol/mL SEQ ID NO2 、10μmol/mL SEQ ID NO3和10μmol/mL SEQ ID NO4各1μL;2*reaction mix 12.5μL;Bst DNA聚合酶1μL;步骤1)中获得的DNA 模板2μL;灭菌去离子水5.5μL;
3)LAMP扩增条件:将配制好反应体系的PCR管于68℃水浴锅中恒温反应60min;然后80℃,5min终止反应;
4)检测结果:电泳步骤3)中的LAMP扩增产物,若产生特异梯状条带,则待测样品中含有柑桔溃疡病菌;若为产生特异梯状条带,则待测样品中不含有柑桔溃疡病菌。
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