[发明专利]一种兰花胶孢炭疽菌分子检测引物及快速检测方法有效
| 申请号： | 201210018466.5 | 申请日： | 2012-01-20 |
| 公开（公告）号： | CN102534017A | 公开（公告）日： | 2012-07-04 |
| 发明（设计）人： | 姚锦爱;余德亿;陈峰;黄鹏;鹿连明 | 申请（专利权）人： | 福建省农业科学院植物保护研究所 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68;C12Q1/04;C12N15/11 |
| 代理公司： | 福州元创专利商标代理有限公司 35100 | 代理人： | 蔡学俊 |
| 地址： | 350013 福建*** | 国省代码： | 福建;35 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 兰花 炭疽 分子 检测 引物 快速 方法 | ||
【权利要求书】：
1.一种兰花胶孢炭疽菌分子检测引物，其特征在于，引物序列为：
上游引物P1: 5‘-GGCCTCCCGCCTCCGGGCGGGTC-3’
下游引物P2: 5‘-TGAGGGCCTACATCAGCT -3’。
2.根据权利要求1所述的兰花胶孢炭疽菌分子检测引物，其特征在于，所述引物P1和 P2对兰花胶孢炭疽菌特异性扩增出304bp的产物。
3.一种兰花胶孢炭疽菌的快速检测方法，其特征在于：包括以下步骤：
（1）提取植株或栽培基质DNA；
（2）PCR扩增；PCR反应体系25μl，包括 Taq PCR Master Mix 12.5μL，2×10-5～200ng模板DNA，10 umol/ L权利要求1所述的上游引物P1和下游引物 P2各1μL，加ddH2O至总体积达25μL； PCR反应条件为：94℃ 预变性5min；94℃变性60sec，70℃退火60 sec，72℃延伸60 sec，共35个循环；72 ℃延伸7 min；
（3）PCR扩增产物用琼脂糖电泳分离，根据扩增产物的大小判定结果，如果能特异性地扩增出304 bp的产物，即判断所述的植株或栽培基质中存在兰花胶孢炭疽菌。
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