[发明专利]一种同时测定白酒中10种挥发性酚类化合物的方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种同时测定白酒中10种挥发性酚类化合物的方法，属于白酒检测技术领域。

背景技术

饮料酒中通常含有一些酚类物质。它们已经被发现存在于啤酒，葡萄酒还有蒸馏酒中。挥发性酚类化合物是饮料酒的重要香味组分，由于这一类组分对于酒的闻香、口味以及稳定性等方面均具有重要的作用，因此引起了许多研究者的注意。

国内轻工业部食品发酵研究所1978年以茅台酒为主要研究对象，采用化学衍生法结合GC-FID/GC-MS对白酒中挥发性酚元化合物进行的分析研究中，前处理较繁琐，需要衍生化步骤，并且其中4-甲基愈创木酚、4-乙基愈创木酚的加标回收率只有40％左右。

1990年青岛大学、中国医科院药研所和山东大学陆懋荪、刘春胜、阎长泰用溶剂萃取法提取白酒中的6种挥发酚(青岛大学学报，1990，3(1)，102～105)，使用摸拟酒样500mL，经过加抗氧化剂硫代亚硫酸钠，加2M NaOH溶液调节PH＝12.5，使酚形成酚盐进入水相，蒸馏除去乙醇，用CH₂Cl₂萃取除去碱性和中性成分，再用4M HCl和6％NaHCO₃水溶液调节PH＝8.0，最后用CH₂Cl₂萃取酚，进行GC-FID分析。可见其前处理步骤繁琐，而且只在摸拟酒样进行了实验，6种挥发酚平均回收率为79％，苯酚的回收率为65％，6种挥发酚平均RSD值为6.1％，不能达到检测方法回收率为80～120％，RSD值＜5％的要求，因此没有建立白酒中挥发性酚的分析检测方法。

2010年江南大学生物工程学院朱燕.范来文.徐岩.应用浸入固相微萃取(DI-SPME)与气相色谱-质谱联用(GC-MS)技术(DI-SPME和GC-MS分析白酒中游离酚类化合物，食品与发酵工业，2010，36(10)：138-143，对白酒中挥发性酚类化合物进行了分析，该方法回收率达到85％～115％。但是采用DI-SPME和GC-MS技术，设备较昂贵，操作要求较高，推广普及应用会受到局限，而且该方法只分析了7种挥发性酚类化合物。

2006年，Assadi小组开发了新颖的液相微萃取技术，称作分散液-液微萃取(DLLME)，该方法是建立在三元溶剂系统基础上的，是微型的液-液萃取，使用萃取剂的量可减少至微升级，该方法的优点是操作简单，快速，成本低，回收率高，富集倍数高，对环境友好，现多应用于水中微量物质的分析检测中。对于分散液-液微萃取应用到中国白酒中挥发性酚类物质测定的方法，未见报道。

发明内容

本发明的目的在于，提供一种同时测定白酒中10种挥发性酚类化合物的方法，即建立分散液-液微萃取-高效液相色谱分析白酒中挥发性酚类物质的方法，用于我国白酒中挥发性酚类物质分析。

本发明的技术方案。一种同时测定白酒中10种挥发性酚类化合物的方法，包括下述步骤，

将酒样按酒和水的体积比＝1∶0.5～1稀释后，取稀释酒样5mL装入塑料锥形离心管中，用2mL注射器向酒样中快速注入1-2mL由分散剂和萃取剂组成的混合溶剂，其中分散剂与萃取剂的体积比为7∶3，6∶4，或5∶5，超声5-20min后，以3000-6000r/min离心5min，使有机相沉淀分离，下层有机相作为萃取液转入25mL梨形瓶中，在35℃0.075MPa下旋转蒸发浓缩，到浓缩液的体积为0.7～0.9mL即可，所得浓缩液最后用1％冰醋酸水溶液定容至1～2.0mL，过0.45μm滤膜，供高效液相色谱检测仪分析；

高效液相色谱检测色谱条件：色谱柱：Synergi 4u Hydro-RP 80A，150×4.6mm；流动相由流动相A和流动相B组成，流动相A：冰醋酸/β-环糊精水溶液＝1/100；流动相B：冰醋酸/乙腈/β-环糊精水溶液＝1/40/60，β-环糊精水溶液的β-环糊精浓度为：7.05×10^-3-8.81×10^-3mol/L；梯度洗脱流动相设置：按体积计算，0min：含流动相A 80％，流动相B 20％；30min：流动相A 40％，流动相B 60％；40min：流动相A30％，流动相B 70％；柱流速：1.5mL/min；柱温：25℃；进样量：20μL；

荧光检测器条件：Ex＝270nm，Em＝315nm；

用外标法定量计算出HPLC进样中10种酚的浓度，再换算成酒样中10种酚的浓度。