[发明专利]吡唑苯胺类化合物的制备及其在抗癌治疗中的应用

说明书

技术领域

本发明涉及吡唑苯胺类化合物及其制备方法与抗肿瘤药物。

背景技术

癌症是一种严重威胁人类健康的疾病，临床治愈率很低。癌症是由于细胞的异常增殖引起的，和调控细胞周期相关基因、蛋白的突变和失活密切相关。因此阻断异常的细胞周期对于肿瘤的治疗是一种非常重要的手段。依赖于细胞周期蛋白激酶(Cyclin-dependent-kinase，CDK)是细胞周期进程中一种非常重要的蛋白。CDK一般由两个亚基组成：催化亚基和调控亚基。其中CDK2是最上游也是最重要的一种依赖于细胞周期蛋白激酶，它与细胞周期蛋白A和E结合，激活下游底物丝氨酸和酪氨酸位点的磷酸化，从而在细胞周期G1/S期的转化中起重要的调控作用，近期研究发现，CDK2在G2期中也有调控作用。CDK2在细胞周期和增殖中的重要作用，使其成为肿瘤以及其它细胞异常增殖相关疾病的重要靶点。

几乎所有的CDK抑制剂都是通过竞争性结合ATP结合位点从而抑制其催化活性。吡唑环抗CDK2的活性最早发现于具有CDK2抑制作用的天然产物Purvalanol B中，目前已经成为目前CDK2抑制药物中的重要骨架之一，可以有效的与CDK2中ATP结合位点作用。苯胺类化合物也具有很好的ATP竞争抑制活性，广泛的存在于ATP竞争性抑制剂中。本文中，我们合成了不同取代基的吡唑醛，通过醛基亲核加成、还原修饰不同取代基的苯胺，形成了一系列的未经报道的新化合物。这些新化合物，可能体现出吡唑醛和苯胺在CDK2抑制和抗肿瘤中的协同性。我们测试了这批化合物的生物活性，并发现其对人源宫颈癌Hela细胞具有良好的抑制作用，且能抑制CDK2，引起细胞凋亡。

发明内容

本发明的目的在于提供一类新型吡唑苯胺类化合物以及它们的制备方法与用途。

本发明的技术方案如下：

1.一类吡唑苯胺衍生物，其特征是它有如下通式：

结构式中R1为：4-氟、氯、溴、甲基、甲氧基。

R2为：4-氟、氯、溴、甲基。

2.一种制备上述的吡唑苯胺衍生物的方法，它由下列步骤组成：

步骤1.将取代基苯乙酮(20mmol)、盐酸苯肼(25mmol)、无水乙酸钠(30mmol)分别溶于乙醇，磁力搅拌，50-60℃反应3h(TLC检测反应进行程度)。反应完毕后将反应液旋干，乙酸乙酯和水萃取2-3次，旋干有机层，得固体。

步骤2.先将DMF(4ml)和POCl₃(5ml)混合冰浴30min，然后将步骤1所得固体溶于3ml DMF滴加至上述混合液中，逐渐转入常温至70-80℃反应5h，冷却至常温后，倒入冰水中，用50％NaOH调pH至7-8，抽滤并水洗3遍，烘干后得固体。

步骤3.将步骤2所得产物(1mmol)溶于乙醇(20ml)，加入取代基苯胺(1mmol)，60℃反应5h(TLC检测反应进行程度)。反应完毕后将反应液旋干，四氢呋喃(15ml)溶解后加入NaBH₄(2mmol)。待气泡消失后冰浴滴加I₂的四氢呋喃溶液。30min后转入常温至40-50℃反应12h(TLC检测)。反应完毕后旋干反应液，乙酸乙酯和水萃取2-3次，无水Na₂SO₄干燥，旋干有机层，再减压蒸干溶剂即得到固体物。重结晶或过柱纯化固体物可得到纯净的化合物1-16。

本发明的吡唑苯胺类化合物具有抑制人源宫颈癌Hela细胞增殖的作用。因此本发明的吡唑苯胺类化合物可做潜在的抗肿瘤药物。

具体实施方式

实施例一：4-氟-N-((3-(4-氟苯基)-1-苯基-1H-4-吡唑基)甲基)苯胺(化合物1)的制备