[发明专利]一种鉴别小孢粉孢牛肝菌的特异引物及鉴别方法无效
申请号: | 201210024101.3 | 申请日: | 2012-02-03 |
公开(公告)号: | CN102559906A | 公开(公告)日: | 2012-07-11 |
发明(设计)人: | 李树红;柴红梅;赵永昌;张小雷;苏开美;赵静 | 申请(专利权)人: | 云南省农业科学院生物技术与种质资源研究所 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68;C12N15/11;C12R1/645 |
代理公司: | 昆明正原专利代理有限责任公司 53100 | 代理人: | 金耀生 |
地址: | 650221 *** | 国省代码: | 云南;53 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 鉴别 小孢粉孢 牛肝菌 特异 引物 鉴别方法 | ||
1.一种鉴别小孢粉孢牛肝菌鉴的特异引物,其特征在于特异引物TMf和TMr,其DNA序列为:
TMf:GTC TTT CKC CAT CCC AAC CAA CG
TMr:GAA TCC AAA CMA CTC CAG CCC CG 。
2.一种用权利要求1所述的特异引物鉴别小孢粉孢牛肝菌的方法,其特征在于按以下步骤进行:
(1)牛肝菌样品DNA提取;
(2)以上述DNA为PCR扩增的模板,用特异引物TMf和TMr进行PCR扩增;
(3)取上述(2)的PCR扩增产物在质量浓度为1%的琼脂糖凝胶上电泳,锈化乙锭染色,紫外透射仪检测扩增片段有无及大小。
3.根据权利要求2所述的特异引物鉴别小孢粉孢牛肝菌的方法,其特征在于:所述步骤(2)中PCR扩增条件是:94℃变性5 min,然后进入连续35个循环,每个循环为94℃变性0.5 min,58.2℃退火0.5 min,72℃延伸2 min,循环结束后于72℃延伸5 min。
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